典型文献
荷载LASP-1基因siRNA的条件增殖型腺病毒的构建
文献摘要：
目的:利用腺病毒包装质粒pBHGE3与携带LASP-1 siRNA的穿梭质粒pZD55-LASP-1、pCA13-LASP-1在HEK293细胞内，包装成病毒ZD55-LASP-1和Ad-LASP-1。方法:利用Effectene DNA转染试剂将质粒pBHGE3与质粒pZD55-LASP-1、pCA13-LASP-1分别感染HEK293细胞，纯化并扩增病毒。通过PCR鉴定Ad-LASP-1、ZD55-LASP-1是否包含目的基因，E1区是否缺失及有无野生型腺病毒污染。鉴定正确的病毒进行扩增，CsCl梯度离心纯化，TCID
50法测病毒滴度。
结果:PCR鉴定证明ZD55-LASP-1未混杂野生型腺病毒,且包含目的序列LASP-1 siRNA；Ad-LASP-1 E1区缺失,且包含目的序列LASP-1 siRNA。ZD55-LASP-1滴度为4×10
10 PFU/ml，Ad-LASP-1滴度为2×10
10PFU/ml。Western-blot证实ZD55-LASP-1在肿瘤细胞中表达E1A，Ad-LASP-1不表达E1A。
结论:靶向表达LASP-1 siRNA序列的病毒ZD55-LASP-1重组成功，为肾癌的下一步基因治疗提供了基础。
文献关键词：
LASP-1;肾细胞癌;条件增殖型腺病毒
中图分类号：
作者姓名：
孙方浩;郑骏年;王尚;魏晋;曹希亮;张义静
作者机构：
徐州医科大学附属市立医院泌尿外科 221116;徐州医科大学肿瘤生物治疗实验室 221002
文献出处：
引用格式：
[1]孙方浩;郑骏年;王尚;魏晋;曹希亮;张义静-.荷载LASP-1基因siRNA的条件增殖型腺病毒的构建)[J].国际病毒学杂志,2022(05):369-373
A类：
条件增殖型腺病毒,pBHGE3,pZD55,pCA13,ZD55,Effectene,10PFU
B类：
LASP,siRNA,病毒包装,质粒,穿梭,HEK293,装成,Ad,转染,目的基因,野生型,病毒污染,CsCl,TCID
,病毒滴度,10
,ml,blot,肿瘤细胞,E1A,肾癌,基因治疗,肾细胞癌
AB值：
0.174537
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