目的 建立基于微量细胞中和试验(MRNT)的血清抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体的检测方法,并应用于检测新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病例的血清抗SARS-CoV-2中和抗体水平.方法 用Vero细胞和已知滴度的SARS-CoV-2毒株对待测血清进行基于MRNT的中和抗体检测,对中和反应作用时间、Vero细胞代次等影响试验的关键因素进行验证,并用建立的方法重复4次检测8份血清样品的中和抗体效价,计算变异系数(CV),验证方法的重复性;用建立的方法检测165份COVID-19病例血清样本的中和抗体水平并进行分析;采用磁微粒化学发光免疫分析法(CMIA)检测其中55份感染3～4周的血清样本,并与建立方法的结果比对,分析两者的分布情况及相关性.结果 不同中和反应作用时间(1.0h、1.5h、2.0h)及不同代次(5代、10代、15代)Vero细胞测得血清样本的中和抗体效价相同;8份血清样本重复检测4次结果的CV为0.0％～14.2％,差异无统计学意义(F=0.508,P＞0.05),表明重复性良好;建立的方法测得165份血清阳性率98.18％,中和抗体效价分布范围为4～2048,中位数(M)为128,几何平均效价(GMT)为93.80;对55份感染3～4周的样本,CMIA方法与建立方法检测阳性率均为100.00％,中和抗体分布范围为36.35～2 986.49 AU/mL,M为448.11 AU/mL,GMT为476.94 AU/mL.两种方法检测的中和抗体结果呈明显相关性,相关系数r=0.758.结论 成功建立了血清抗SARS-CoV-2中和抗体的检测方法,该方法具有良好的重复性,可用于评价血清抗SARS-CoV-2中和抗体水平及接种疫苗后的免疫效果.

新型冠状病毒;Vero细胞;中和抗体;微量细胞中和

卢世栋;宋云;毋碧聪;胡晓;马红霞;黄学勇;郭万申

河南省疾病预防控制中心传染病预防控制所,河南郑州450016;河南省传染病病原生物重点实验室

河南预防医学杂志

[1]卢世栋;宋云;毋碧聪;胡晓;马红霞;黄学勇;郭万申-.新型冠状病毒中和抗体检测方法的建立与应用)[J].河南预防医学杂志,2022(12):881-885,890

微量细胞中和,MRNT

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