典型文献
人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1的HMGA2基因敲除模型构建
文献摘要：
目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建稳定敲除高迁移率族蛋白A2（high mobility group protein AT-Hook-2，HMGA2）基因的人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1细胞模型。方法:重组pLV[2gRNA]- EGFP:T2A:Puro- U6>{hHMGA2 [gRNA#A1]*}- U6>{hHMGA2 [gRNA#A2]*}慢病毒质粒载体的构建：设计靶向HMGA2基因的Dual-gRNA序列，将合成的Dual-gRNA片段克隆到pLV [2gRNA]- EGFP：T2A:Puro-U6载体中，提取单克隆进行测序验证。成功构建的重组质粒载体进行慢病毒包装，并感染TPC-1细胞，利用嘌呤霉素进行筛选获得HMGA2敲除的单克隆，进行PCR及测序验证，实时荧光定量qPCR检测细胞中HMGA2 mRNA的敲除效率。结果:经测序验证，成功构建了靶向HMGA2基因的pLV [2gRNA]- EGFP：T2A:Puro-U6>{hHMGA2 [gRNA#A1]*}-U6> {hHMGA2 [gRNA#A2]*}质粒。挑取单克隆进行PCR鉴定及基因测序，成功获得了HMGA2完全敲除的TPC-1细胞。经实时荧光定量qPCR检测HMGA2敲除的TPC-1细胞，未表达HMGA2 mRNA。结论:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术能成功构建稳定敲除HMGA2基因的人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1细胞模型。
文献关键词：
CRISPR/Cas9;人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1;甲状腺癌;HMGA2
中图分类号：
作者姓名：
勇宏;李小娟;金山;刘友胜;乌云图;白银宝;塔拉
作者机构：
内蒙古医科大学附属医院甲状腺乳腺外科，呼和浩特 010050;勇宏现在锡林郭勒盟中心医院甲状腺乳腺外科，锡林浩特 026000;内蒙古自治区健康管理中心，呼和浩特 010010;大同市第三人民医院普外科，大同 037008;内蒙古自治区人民医院甲状腺肿瘤外科，呼和浩特 010020
文献出处：
引用格式：
[1]勇宏;李小娟;金山;刘友胜;乌云图;白银宝;塔拉-.人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1的HMGA2基因敲除模型构建)[J].中华内分泌外科杂志,2022(04):421-425
A类：
2gRNA,hHMGA2,gRNA#A1,gRNA#A2
B类：
甲状腺乳头状癌,癌细胞,细胞系,TPC,基因敲除,CRISPR,Cas9,基因编辑技术,技术构建,高迁移率族蛋白,high,mobility,group,protein,AT,Hook,细胞模型,pLV,EGFP,T2A,Puro,U6,病毒质,Dual,单克隆,重组质粒,慢病毒包装,嘌呤霉素,qPCR,除效率,基因测序,甲状腺癌
AB值：
0.181715
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