典型文献
构建C5orf13基因慢病毒载体对SGC-7901细胞恶性生物学行为的影响
文献摘要：
目的 构建5号染色体开放阅读框13(chromosome 5 open reading frame 13,C5orf13)基因siRNA慢病毒载体,探讨其对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 针对人C5orf13基因设计3个不同的siRNA靶点,构建重组质粒,包装GV115慢病毒.取对数生长期SGC-7901细胞,分为KD1组、KD2组、KD3组和阴性对照组,前3组分别转染3个不同siRNA靶点的GV115慢病毒,阴性对照组转染阴性对照慢病毒.转染72 h,用嘌呤霉素筛选稳转细胞株,4组转染效率均＞90％时,采用实时荧光定量PCR法检测4组细胞C5orf13 mRNA相对表达量,筛选出表达最低的KD2组细胞为C5orf13敲低组.取SGC-7901细胞为空白对照组.采用MTT实验检测空白对照组、阴性对照组、C5orf13敲低组转染后培养0、24、48、72、96 h时细胞增殖吸光度(optical density,OD)值,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力.结果 KD1组(0.45±0.04)、KD2组(0.25±0.02)、KD3组(0.49±0.04)细胞C5orf13 mRNA相对表达量均低于阴性对照组(1.00±0.04)(P＜0.05),KD1组、KD3组均高于KD2组(P＜0.05),KD1组与KD3组比较差异无统计学意义(P＞0.05).空白对照组、阴性对照组、C5orf13敲低组转染后培养0 h时细胞增殖OD值比较差异无统计学意义(P＞0.05);C5orf13敲低组转染后培养24、48、72、96 h时细胞增殖OD值(0.30±0.01、0.51±0.03、0.62±0.03、0.93±0.13)均低于空白对照组(0.36±0.03、0.64±0.03、0.81±0.04、1.39±0.10)和阴性对照组(0.36±0.02、0.63±0.02、0.79±0.05、1.30±0.07)(P＜0.05),空白对照组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).C5orf13敲低组细胞迁移率[(0.24±0.01)％]及侵袭率[(3.07±0.13)％]均低于空白对照组[(0.41±0.05)％、(4.91±0.66)％]和阴性对照组[(0.38±0.03)％、(4.70±0.23)％](P＜0.05),空白对照组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 构建的C5orf13基因siRNA慢病毒载体可明显下调SGC-7901细胞C5orf13表达,抑制SGC-7901细胞增殖、迁移及侵袭能力.
文献关键词：
胃癌;5号染色体开放阅读框13基因;慢病毒载体;SGC-7901细胞;细胞增殖;细胞迁移;细胞侵袭
中图分类号：
作者姓名：
张高丽;刘立业
作者机构：
河南省人民医院阜外华中心血管病医院郑州大学人民医院检验科,河南郑州 451464;西部战区总医院普通外科中心,四川 成都 610083
文献出处：
引用格式：
[1]张高丽;刘立业-.构建C5orf13基因慢病毒载体对SGC-7901细胞恶性生物学行为的影响)[J].中华实用诊断与治疗杂志,2022(07):662-666
A类：
C5orf13,GV115,KD2,KD3
B类：
慢病毒载体,SGC,细胞恶性生物学行为,开放阅读框,chromosome,open,reading,frame,siRNA,胃癌,迁移和侵袭,重组质粒,对数生长期,KD1,嘌呤霉素,稳转细胞株,转染效率,相对表达量,出表,敲低,空白对照,MTT,实验检测,吸光度,optical,density,OD,细胞划痕实验,细胞迁移能力,Transwell,小室,细胞侵袭能力,细胞迁移率,迁移及侵袭
AB值：
0.165591
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