目的 探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)基因沉默对人食管癌EC9706细胞迁移、侵袭的影响及其作用机制.方法 取对数生长期人食管癌EC9706细胞随机分为对照组、空载组及沉默组,分别转染LipofectamineTM 2000、含无义随机序列(siRNA-NC-PGCsi3.0)和EphA2干扰序列(EphA2-siRNA-PGC-si3.0)质粒和脂质体的复合物.稳定转染后,Brd U法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR和Western blotting分别检测细胞中EphA2、Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA及蛋白相对表达量.结果 对照组、空载组、沉默组Brd U阳性率分别为(26.48±2.79)％、(23.52±2.57)％、(13.29±2.06)％,Brd U阳性率组间比较,差异有统计学意义(F=38.560,P=0.000).与对照组、空载组比较,沉默组Brd U阳性率降低(P<0.05);对照组与空载组比较,差异无统计学意义(P>0.05).对照组、空载组、沉默组细胞划痕愈合率分别为(83.16±8.31)％、(82.35±7.24)％、(34.24±5.27)％,细胞划痕愈合率组间比较,差异有统计学意义(F=78.869,P=0.000).与对照组、空载组比较,沉默组细胞划痕愈合率降低(P<0.05);对照组与空载组比较,差异无统计学意义(P>0.05).对照组、空载组、沉默组穿膜细胞数分别为(326.74±33.15)个、(331.27±34.59)个、(126.23±26.18)个,穿膜细胞数组间比较,差异有统计学意义(F=68.997,P=0.000),与对照组、空载组比较,沉默组穿膜细胞数减少(P<0.05);对照组与空载组比较,差异无统计学意义(P>0.05).细胞中EphA2、Wnt1、β-catenin、E-cadherin、Vimentin mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05),与对照组、空载组比较,沉默组Wnt1、β-catenin、Vimentin mRNA相对表达量降低(P<0.05),E-cadherin mRNA相对表达量升高(P<0.05).对照组、空载组、沉默组细胞中EphA2、Wnt1、β-catenin、E-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05),与对照组、空载组比较,沉默组EphA2、Wnt1、β-catenin、Vimentin蛋白相对表达量降低(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量升高(P<0.05).对照组和空载组上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 EphA2基因沉默对人食管癌EC9706细胞迁移和侵袭有一定的抑制作用,其机制可能与阻止Wnt/β-catenin信号通路相关.

食管肿瘤;促红细胞生成素产生肝细胞受体A2;迁移;侵袭

任利兵;贾如江;苏春永;杨晓光;秦景云

邯郸市中心医院 胸外科,河北 邯郸 056001

中国现代医学杂志

[1]任利兵;贾如江;苏春永;杨晓光;秦景云-.EphA2基因沉默对人食管癌EC9706细胞迁移、侵袭的影响及其机制研究)[J].中国现代医学杂志,2022(01):40-46

PGCsi3,si3,Brd

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