目的 观察理脾复方制剂含药血清对大鼠下丘脑神经元细胞瘦素(LP)、神经肽Y(NPY),八肽胆囊收缩素(CCK-8)等蛋白及基因的调控影响,探讨其治疗厌食的作用机制.方法 50只大鼠随机分为对照组,低、中、高剂量理脾复方制剂组,硫酸锌组,每组10只.对照组灌胃给予等体积饮用水;硫酸锌组灌胃给予20 mg/kg硫酸锌口服溶液;低、中、高理脾复方制剂组分别灌胃给予2.4、4.8和9.8 g/kg理脾复方制剂,各组每日灌胃1次,连续7 d,末次灌胃后股动脉采血制备含药血清.体外培养大鼠下丘脑神经元细胞,MAP2免疫荧光鉴定细胞.采用CCK-8法筛选对照组、理脾复方制组(低、中、高剂量组),硫酸锌组在0、2、4、6、8、12、24、36、48 h对下丘脑神经元活性的影响,发现在24 h后时,各含药血清组对下丘脑神经元细胞活性开始增强并具有区别性.ELISA检测下丘脑神经元细胞上清液中LP、NPY、CCK-8的含量;Western Blot法及实时荧光定量PCR法分别检测下丘脑神经元细胞LP、NPY、CCK-8蛋白及基因相对表达量.结果 细胞鉴定为下丘脑神经元细胞.与对照组比较,低、中、高剂量理脾复方制剂组中下丘脑神经元细胞上清液中LP、NPY、CCK-8含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);中、高剂量理脾复方制剂组下丘脑神经元细胞中LP、NPY、CCK-8蛋白相对表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);高剂量理脾复方制剂组下丘脑神经元细胞中LP基因相对表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量理脾复方制剂组下丘脑神经元细胞中NPY、CCK-8基因相对表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 理脾复方制剂治疗可能通过综合调节下丘脑神经元中LP、NPY、CCK-8蛋白及基因表达,实现改善厌食相关症状,但其影响作用与剂量呈负相关性.

理脾复方制剂;下丘脑;神经元细胞;原代培养;LP;NPY;CCK-8

刘启艳;张力文;詹伟;李春;庞平;高娜;彭玉

550003 贵阳,贵阳市妇幼保健院儿童康复医学科;550003 贵阳,贵州中医药大学第二附属医院儿科;551702 贵州 毕节,毕节市中医院儿科;554399 贵州 铜仁,铜仁市中医院儿科

中国中西医结合儿科学

[1]刘启艳;张力文;詹伟;李春;庞平;高娜;彭玉-.理脾复方制剂含药血清对大鼠下丘脑神经元细胞瘦素、神经肽Y、八肽胆囊收缩素蛋白与基因的影响)[J].中国中西医结合儿科学,2022(01):10-15

理脾复方制剂

含药血清,下丘脑,脑神经元,神经元细胞,瘦素,神经肽,胆囊收缩素,LP,NPY,CCK,白及,厌食,高剂量,硫酸锌,灌胃,饮用水,股动脉,动脉采血,体外培养,养大,MAP2,免疫荧光,选对,细胞活性,区别性,上清液,Blot,基因相对表达量,细胞鉴定,含量降低,白相,节下,食相,原代培养

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