典型文献
miR-19a在鼻咽癌细胞上皮间质转化中的作用
文献摘要：
目的 研究微小RNA-19a(miR-19a)在鼻咽癌细胞中的表达以及对体外鼻咽癌细胞上皮间质转化(EMT)的作用.方法 利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-19a在鼻咽癌细胞株CNE2、SUNE-1、HNE1、58F及人正常鼻咽上皮细胞株NP69中的转录水平;使用miR-19a模拟物(miR-19a mimics)、miR-19a抑制剂(miR-19a inhibitor)及其阴性对照瞬时转染体外鼻咽癌细胞;光学显微镜下观察细胞形态;Transwell小室实验检测细胞侵袭;Western blot实验测定E-cad-herin、N-cadherin、KRAS、p-FAK和p-SRC的表达;通过生物信息学工具TargetScan研究miR-19a可能靶向调控基因,荧光素酶报告实验测定荧光素酶活性在鼻咽癌细胞中的表达;通过挽救实验验证miR-19a是否直接作用于靶基因从而调控鼻咽癌细胞的EMT行为.结果 miR-19a在NP69细胞中的表达水平分别为CNE2、SUNE-1、HNE1和58F细胞的5.88、3.57、11.11和6.67倍,差异均有统计学意义(P<0.01);SUNE-1细胞转染miR-19a mimics促进miR-19a表达后,细胞侵袭能力明显下降[(10.5±2.1)比(25.6±4.4),P<0.01],HNE1细胞转染miR-19a inhibitor抑制miR-19a表达后,细胞侵袭能力明显增强[(34.2±4.9)比(16.9±2.5),P<0.01];通过生物学信息预测相关的靶基因和荧光素酶报告实验验证KRAS是miR-19a的直接作用靶点;mimics NC组、miR-19a mimics组和miR-19a mimics+KRAS mimics组侵袭细胞数分别为(28.3±3.4)、(11.6±1.5)和(23.7±2.8),上调KRAS的表达可部分逆转miR-19a对鼻咽癌细胞侵袭能力的抑制作用(P<0.01);Western blot结果表明,上调miR-19a表达可抑制N-cadherin、p-FAK和p-SRC蛋白表达,上调E-cadherin表达,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞经转染KRAS mimics后,miR-19a mimics对E-cadherin、N-cad-herin、p-FAK和p-SRC蛋白表达的调控作用明显被削弱.结论 miR-19a可抑制鼻咽癌细胞EMT,该抑癌作用可能是miR-19a通过靶基因KRAS负性调控FAK/SRC信号通路来实现的.
文献关键词：
鼻咽癌;miR-19a;KRAS;上皮间质转化
中图分类号：
作者姓名：
孙海力;林文巧;李绍霄;陈恩就
作者机构：
温州医科大学附属平阳医院耳鼻喉科,平阳 325400
文献出处：
引用格式：
[1]孙海力;林文巧;李绍霄;陈恩就-.miR-19a在鼻咽癌细胞上皮间质转化中的作用)[J].浙江中西医结合杂志,2022(03):207-212
A类：
58F,mimics+KRAS
B类：
miR,19a,鼻咽癌细胞,细胞上皮间质转化,EMT,qPCR,细胞株,CNE2,SUNE,HNE1,上皮细胞,NP69,转录水平,inhibitor,光学显微镜,显微镜下,细胞形态,Transwell,小室,实验检测,blot,实验测定,cadherin,FAK,SRC,生物信息学工具,TargetScan,靶向调控,调控基因,荧光素酶报告实验,荧光素酶活性,挽救,直接作用,靶基因,细胞转染,细胞侵袭能力,明显增强,信息预测,作用靶点,NC,癌细胞侵袭,可抑制,抑癌作用,负性调控
AB值：
0.175416
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