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典型文献
耻垢分枝杆菌MSMEG_4259的基因组维护功能研究
文献摘要:
MSMEG_4259基因及其同源基因广泛存在于分枝杆菌属中.蛋白序列分析显示,MSMEG_4259包含DEDDh核酸外切酶结构域以及一个类似UvrC的核酸内切酶结构域,提示其可能参与DNA修复.为了探究MSMEG_4259的生理功能,本研究利用同源重组方法在耻垢分枝杆菌(Mycolicibacterium smegmatis)构建了MSMEG_4259基因敲除(ΔMs4259)菌株,并采用波动试验测定菌株在对数生长期以及H2 O2处理后的利福平耐药突变频率.结果显示,ΔMs4259菌株的利福平耐药自发突变频率较野生型菌株升高1.9倍(P<0.05),该表型能够通过表达MSMEG_4259回补.测定耐药突变菌株rpoB基因的耐药决定区域序列,发现ΔMs4259菌株的A:T>C:G突变概率较野生型菌株上升约10倍,有研究证明该突变谱是DNA氧化损伤的常见突变.实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)结果显示,野生型菌株的MSMEG_4259表达在H2 O2处理后上调约7倍,提示该基因在转录水平参与了氧化压力应答.野生型菌株与ΔMs4259菌株在氧氟沙星、叔丁基过氧化氢和紫外线处理下的存活率无显著差异,提示MSMEG_4259不参与耻垢分枝杆菌对上述DNA损伤剂的耐受.本研究初步揭示了MSMEG_4259参与耻垢分枝杆菌基因组维护的生理功能、突变谱及转录调控等特性,为进一步研究其同源基因在结核分枝杆菌致病和耐药中的作用机制奠定了基础.
文献关键词:
MSMEG_4259;耻垢分枝杆菌;DNA损伤;DNA修复
作者姓名:
邓茗芝;许原原;吕亮东
作者机构:
复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室,上海200032
文献出处:
引用格式:
[1]邓茗芝;许原原;吕亮东-.耻垢分枝杆菌MSMEG_4259的基因组维护功能研究)[J].微生物与感染,2022(05):273-281
A类:
DEDDh,UvrC,Ms4259
B类:
耻垢分枝杆菌,MSMEG,功能研究,同源基因,分枝杆菌属,蛋白序列分析,核酸外切酶,酶结构,结构域,核酸内切酶,生理功能,研究利用,同源重组,组方,Mycolicibacterium,smegmatis,基因敲除,对数生长期,H2,O2,利福平耐药,耐药突变,突变频率,自发突变,野生型,过表达,rpoB,突变谱,氧化损伤,实时荧光定量聚合酶链反应,real,fluorescence,quantitative,polymerase,chain,reaction,qRT,转录水平,氧化压力,氧氟沙星,叔丁基过氧化氢,紫外线,转录调控,结核分枝杆菌
AB值:
0.282575
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