目的 探究来源于肝细胞的内质网应激(ERS)信号对小鼠原代肝星状细胞(p-HSCs)的影响.方法 在体外利用ERS激动剂衣霉素(TM)刺激小鼠肝细胞系AML1212 h,随后更换正常培养基培养16 h,收集细胞培养上清离心(ERS传递条件培养基),加入有p-HSCs的细胞培养皿中继续培养24 h.显微镜下观察细胞形态变化.采用Real-time PCR(qPCR)和蛋白质印迹法检测ERS相关指标GRP78、IRE1α、PERK、CHOP的表达,并进一步利用qPCR检测纤维化相关指标Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、转化生长因子β(TGFβ)的表达;以及凋亡相关基因Bax、Fas和Bcl2的表达.结果 显微镜下观察细胞形态,发现加有TM的AML12细胞与对照组相比,出现细胞皱缩变圆,胞质浓缩,细胞生长受到抑制;加有相应ERS传递条件培养基的p-HSCs细胞形态未发生明显变化,细胞生长轻微受抑制.与正常对照相比,经TM刺激后的AML12细胞,ERS相关基因GRP78、PERK分别升高12.4倍和1.5倍,同时ERS相关蛋白GRP78、PERK、P-PERK的表达也增加2.0、1.8、2.0倍,差异有统计学意义(P<0.05).接受ERS传递的p-HSCs与未接受ERS信号的对照组相比,GRP78、IRE1α、PERK、CHOP基因表达分别升高1.3、1.3、1.18和1.3倍,GRP78、IRE1α、ATF6蛋白表达水平也升高1.6、2.0、1.8倍,差异有统计学意义(P<0.05).接受ERS传递的p-HSCs促凋亡基因Bax、Fas的表达显著上调(分别升高2.2、1.2倍),抑制凋亡基因Bcl2表达下调(为对照组的60％),差异有统计学意义(P<0.05);而HSC纤维化相关基因TGFβ、CollagenⅠ、CollagenⅢ的表达两组之间未见明显差异.结论 ERS可以从肝细胞传递至HSCs,并可诱导HSCs凋亡.

肝细胞;星状细胞;内质网应激

王晓凡;谢超;刘天会;王萍;范旭;刘琳;丛敏

首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心 肝硬化转化医学北京市重点实验室暨国家消化系统疾病临床医学研究中心 北京 100050

临床和实验医学杂志

[1]王晓凡;谢超;刘天会;王萍;范旭;刘琳;丛敏-.内质网应激传递对肝星状细胞的影响)[J].临床和实验医学杂志,2022(05):449-453

AML1212

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