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改良Alu-PCR技术检测HepG2.2.15细胞HBV整合的研究
文献摘要：
目的 采用改良Alu-PCR技术检测HepG2.2.15细胞中HBV整合位点.方法 对传统检测HBV整合的Alu-PCR技术进行改良简化,检测HepG2.2.15细胞中的HBV整合位点,HepG2细胞进行对照.RT-PCR定量检测HepG2.2.15细胞中检测到的HBV整合位点和cccDNA水平.结果 在HepG2.2.15细胞中检测到一插入Alu重复序列的HBV整合位点,病毒结合端为1228 nt,嵌合片段有3bp的同源序列(CTG).加入双氧水(H2 O2)的HepG2.2.15细胞中该整合位点水平为(-1.13±0.07)lg拷贝/细胞高于未加入H2 O2的(-2.10±0.82)lg拷贝/细胞,差异有统计学意义(P<0.01).加入H2O2的HepG2.2.15细胞中cccDNA水平为(-1.94±1.45)lg拷贝/细胞,未加入H2O2的为(-1.79±1.40)lg拷贝/细胞,差异无统计学意义(P=0.915).该整合位点和cccDNA水平无显著相关性(P=0.463).结论 采用简易、经济的改良Alu-PCR技术检测HBV整合位点有效简化了实验步骤和节省实验费用,大大降低了HBV整合研究的门槛.对整合位点的定量检测显示肝细胞持续损伤可导致HBV整合细胞的优势克隆扩增.
文献关键词：
乙型肝炎病毒;HBV整合;Alu-PCR技术;HepG2 .2 .15细胞
中图分类号：
作者姓名：
阮鹏;何春萍;黄超;周瑞
作者机构：
430060 湖北 武汉大学人民医院消化内科
文献出处：
引用格式：
[1]阮鹏;何春萍;黄超;周瑞-.改良Alu-PCR技术检测HepG2.2.15细胞HBV整合的研究)[J].肝脏,2022(07):785-788
A类：
3bp
B类：
Alu,HepG2,HBV,整合位点,定量检测,cccDNA,重复序列,nt,嵌合,CTG,双氧水,lg,拷贝,未加,H2O2,显著相关性,实验步骤,大大降低,整合研究,肝细胞,乙型肝炎病毒
AB值：
0.205056
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