目的:建立一种能同时测定血清中6种类固醇激素[包括孕酮(P)、17-羟基孕酮(17-OHP)、皮质醇(COL)、去氢表雄酮(DHEA)、双氢睾酮(DHT)、硫酸去氢表雄酮(DHEAS)]的快速、灵敏的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)方法.方法:血清样本经甲基叔丁基醚液液萃取,高速离心后上清液氮气吹干,加入复溶液后上机检测.采用安捷伦C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,水相A为纯水,有机相B为纯甲醇,质谱采用电喷雾电离(ESI)模式进行离子化,多反应监测模式(MRM)扫描,同位素稀释法进行定量分析.结果:血清中6个类固醇激素检测限(LOD,以信噪比(S/N)≥3为标准)为0.03～1.25 ng·mL-1;定量限(LOQ,以信噪比(S/N)≥10为标准)为0.05～2.50 ng·mL-1;在0.05～4000 ng·mL-1范围内线性关系良好,相关系数(r)≥0.9950;低浓度样本日内精密度为2.4％～6.2％;中浓度样本日内精密度为2.3％～5.7％;高浓度样本日内精密度为1.3％～5.4％.低浓度样本日间精密度为0.4％～2.6％;中浓度样本日间精密度为0.3％～3.9％;高浓度样本日间精密度为0.2％～4.7％.加标回收率为86％～106％.结论:建立一种能同时测定血清中6个类固醇激素的HPLC-MS/MS方法.该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强,可在6.5 min之内完成分离和检测,适用于人体血清中多种类固醇激素含量的定量分析.

类固醇激素;血清;高效液相色谱串联质谱

黄和飞;谷叶;李佳兴;夏跃莲;何水兰;代秋琼;吕小波

昆明和合医学检验所有限公司 实验室,昆明 650106

药学与临床研究

[1]黄和飞;谷叶;李佳兴;夏跃莲;何水兰;代秋琼;吕小波-.液相色谱串联质谱法测定人体血清中的类固醇激素)[J].药学与临床研究,2022(04):300-304

液相色谱串联质谱法,定人,人体血清,类固醇激素,同时测定,孕酮,OHP,皮质醇,COL,去氢表雄酮,双氢睾酮,DHT,DHEAS,高效液相色谱串联质谱,HPLC,血清样本,甲基叔丁基醚,液液萃取,高速离心,上清液,液氮,氮气,气吹,吹干,上机,安捷伦,C18,色谱柱,水相,纯水,有机相,电喷雾电离,ESI,离子化,多反应监测模式,MRM,同位素稀释法,激素检测,检测限,LOD,定量限,LOQ,内线,本日,日间精密度,加标回收率,灵敏度高,激素含量

0.325069