目的 通过使用特异性抑制剂ZVAD和KN93分别抑制细胞凋亡和程序性坏死的发生,来比较在心肌缺血再灌注损伤中哪一种细胞死亡方式占比更大.方法 选择雄性C57/BL6小鼠40只,随机分为假手术(sham)组、缺血再灌注(I/R)组、ZVAD组和KN93组,在结扎前15 min,sham组不做处理,I/R组注射二甲基亚砜(DMSO)溶液,ZVAD组和KN93组则分别注射ZVAD和KN93溶液,建立心肌缺血再灌注损伤模型.氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测心肌梗死面积,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测心肌肌钙蛋白I(cTnI),炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)水平,用蛋白印迹(WesternBlot)检测特异蛋白受体相互作用蛋白激酶-3(RIP3)和胱天蛋白酶-3(caspase-3)的表达.结果(1)ZVAD组和KN93组较I/R组心肌梗死面积明显缩小(P＜0.05),且KN93组相比ZVAD组,心肌梗死面积更小(P＜0.05);(2)ZVAD和KN93处理后相比I/R组,cTnI表达明显减少(P＜0.05),而KN93组cTnI低于ZVAD组(P＜0.05);(3)IL-1β和TNF-α在I/R组中明显升高(P＜0.01),而在ZVAD组和KN93组中明显降低(P＜0.05),KN93组IL-1β和TNF-α明显低于ZVAD组(P＜0.05);(4)caspase-3和RIP3的表达在I/R组显著升高(P＜0.05),而ZVAD和KN93组相对于I/R组二者的表达有所减少.其中RIP3的表达,KN93组相比I/R组显著下降(P＜0.05),ZVAD组相比I/R组有所下降,但无统计学意义(P＞0.05);caspase-3的表达,ZVAD组相比I/R组显著下降(P＜0.05),KN93组相比I/R组无统计学意义(P＞0.05).结论(1)ZVAD和KN93干预可以减轻I/R损伤,起到心肌保护作用;(2)KN93相比ZVAD在减少心肌细胞死亡方面存在较大优势,提示在I/R损伤中,相比细胞凋亡,程序性坏死可能起更大作用.

细胞凋亡;程序性坏死;心肌缺血再灌注损伤;ZVAD;KN93

郭双;吕勃

西安市第一医院心血管内科,陕西 西安 710002;哈尔滨医科大学附属第二医院心内科,黑龙江 哈尔滨 150081

心血管病学进展

[1]郭双;吕勃-.细胞凋亡和程序性坏死在心肌缺血再灌注损伤中的作用研究)[J].心血管病学进展,2022(12):1148-1152

ZVAD

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