目的 研究海星皂苷面包海星3(Culcita novaeguineae-3,CN-3)诱导胶质瘤U251和LN229细胞焦亡的作用.方法 将胶质瘤U251和LN229细胞分别设置为空白对照组及CN-3低、高剂量组(3μM、6μM).(1)细胞增殖测定(cell counting kit-8,CCK-8)法检测面包海星3(CN-3)抑制胶质瘤U251和LN229细胞增殖的给药剂量,分析CN-3对胶质瘤细胞的抑制率.(2)通过透射电镜比较空白对照组及CN-3低剂量组(3μM),观察CN-3诱导胶质瘤细胞膜形态学改变.(3)流式细胞术检测各组胶质瘤细胞焦亡细胞(Annexin V+/PI+表示焦亡细胞)比例、早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-表示早期凋亡细胞)比例.(4)蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测各组中CN-3诱导胶质瘤U251与LN229细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、剪切型胱天蛋白酶-1(Cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Cleaved Caspase-1)、剪切型gasdermin D蛋白N端(Cleaved N-terminal-gasdermin D,Cleaved N-terminal-GSDMD)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的表达.结果 CN-3呈剂量依赖性抑制U251和LN229细胞增殖;给药后胶质瘤细胞形态改变,局部出现气泡状凸起,细胞膜失去完整性,出现多个孔隙;流式检测表明CN-3可诱导胶质瘤细胞焦亡;与空白对照组相比,CN-3上调胶质瘤U251和LN229细胞内NLRP3、Cleaved Caspase-1、Cleaved N-terminal-GSDMD、IL-1β的表达.结论 CN-3通过激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路诱导胶质瘤U251和LN229细胞焦亡.

胶质瘤;海星皂苷;海星皂苷面包海星3;细胞焦亡;U251细胞;LN229细胞

杜洋;邱鹏程;王媛媛;郑淑娴;孙光强;陆云阳;薛玉叶;汤海峰

710032 西安,空军军医大学药学系;陕西中医药大学药学院;空军特色医学中心药剂科

环球中医药

[1]杜洋;邱鹏程;王媛媛;郑淑娴;孙光强;陆云阳;薛玉叶;汤海峰-.海星皂苷CN-3激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路诱导胶质瘤细胞焦亡的作用)[J].环球中医药,2022(11):2022-2029

Culcita,novaeguineae

海星皂苷,CN,NLRP3,Caspase,GSDMD,胶质瘤细胞,细胞焦亡,面包,U251,LN229,空白对照,高剂量,cell,counting,kit,CCK,制胶,给药剂量,抑制率,过透,透射电镜,细胞膜,流式细胞术,Annexin,V+,PI+,蛋白免疫印迹法,blot,WB,NOD,样受体,体热,蛋白结构域,like,receptor,thermal,domain,associated,胱天蛋白酶,Cleaved,cysteinyl,aspartate,specific,proteinase,gasdermin,terminal,Interleukin,剂量依赖,量依赖性,细胞形态,形态改变,气泡,泡状,凸起

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