典型文献
GABRG2基因敲除小鼠和HT22细胞通过激活PKA/NF-κB信号通路影响MMP3的表达
文献摘要:
目的 探究GABRG2基因敲除后小鼠海马和HT22细胞中基质金属蛋白酶(MMP)3的表达变化及潜在参与机制.方法 动物实验:利用Cre/loxp重组酶系统所构建的GABAA受体γ2亚基(GABRG2)基因条件性敲除小鼠(GABRG2fl/wtCre+)模型为实验组,野生型小鼠作为对照组,用Western blot技术检测小鼠海马中GABRG2、PKA、p-PKA、NF-κB、MMP3蛋白的表达情况;免疫荧光技术观察海马中GABRG2、MMP3蛋白的表达情况;尼氏染色技术观察GABRG2基因缺失对小鼠海马神经元的影响.细胞实验:利用CRISPR/Cas9技术构建GABRG2基因敲除的HT22细胞为实验组,HT22细胞为对照组.Western blot技术检测各组细胞中GABRG2、PKA、p-PKA、NF-κB、MMP3蛋白的表达情况;免疫荧光技术观察各组细胞中GABRG2、MMP3蛋白的表达情况.结果 动物实验:Western blot结果显示,与对照组小鼠相比,实验组小鼠海马组织中GABRG2蛋白表达降低(P<0.05),p-PKA、NF-κB、MMP3蛋白表达均升高(P均<0.05),PKA蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);免疫荧光结果显示,与对照组小鼠相比,实验组小鼠海马区GABRG2表达降低,MMP3表达升高,特别在海马CA3区表达明显升高.尼氏染色结果显示,与对照组小鼠相比,实验组小鼠海马神经元的结构松散,神经元离散程度提高.细胞实验:Western blot结果显示,与对照组细胞相比,实验组细胞GABRG2蛋白表达降低(P<0.05),p-PKA、NF-κB、MMP3蛋白表达均升高(P均<0.05),PKA表达差异无统计学意义(P>0.05);细胞免疫荧光结果显示,与对照组细胞相比,实验组细胞GABRG2的表达降低,MMP3的表达升高.结论 GABRG2基因缺失小鼠海马和HT22细胞均引起MMP3蛋白表达增高,其机制可能与上游PKA/NF-κB信号通路的调控有关.
文献关键词:
GABRG2基因;基质金属蛋白酶;基因敲除;癫痫;小鼠;HT22细胞
中图分类号:
作者姓名:
陈章平;李信晓;郭胜楠;孙涛;扈启宽
作者机构:
宁夏医科大学宁夏颅脑疾病重点实验室,银川 750004;郑州大学第五附属医院神经外科,郑州 450052;郑州大学第五附属医院康复医学科,郑州 450052;宁夏医科大学基础医学院,银川 750004
文献出处:
引用格式:
[1]陈章平;李信晓;郭胜楠;孙涛;扈启宽-.GABRG2基因敲除小鼠和HT22细胞通过激活PKA/NF-κB信号通路影响MMP3的表达)[J].宁夏医科大学学报,2022(07):656-662
A类:
GABRG2fl,wtCre+
B类:
基因敲除小鼠,HT22,PKA,MMP3,基质金属蛋白酶,表达变化,参与机制,动物实验,loxp,重组酶,酶系统,GABAA,亚基,条件性敲除,野生型,blot,免疫荧光技术,技术观,尼氏染色,小鼠海马神经元,细胞实验,CRISPR,Cas9,技术构建,海马组织,表达差异,海马区,CA3,染色结果,离散程度,细胞免疫,基因缺失小鼠,癫痫
AB值:
0.165906
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