典型文献
CRISPR/Cas9系统构建ROCK2基因敲除肺癌细胞系
文献摘要：
目的 利用CRISPR/Cas9编辑系统对人肺癌细胞系A549、H460细胞中Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(ROCK2)基因进行稳定敲除,并对其敲除效果进行验证.初步探讨ROCK2基因敲除肺癌细胞株的细胞水平上的功能改变.方法 利用Rock-2 CRISPR质粒和Rock-2 HDR质粒转染构建A549、H460 ROCK2基因敲除稳定细胞株.蛋白质印迹法验证敲除效果、用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ROCK2基因的mRNA表达水平.平板克隆形成实验、M T T法检测各细胞株的增殖能力.结果 A549、H460肺癌细胞中ROCK2基因稳定敲除株构建成功.与原始细胞株相比,ROCK2敲除株细胞中的蛋白表达水平完全缺失,细胞内的mRNA表达水平显著下降,而且能降低A549、H460肺癌细胞的增殖能力.结论 利用CRISPR/Cas9基因编辑系统获得ROCK2基因敲除的肺癌细胞系,为进一步研究ROCK2对肺癌生长的影响奠定基础.
文献关键词：
ROCK2;肺癌;CRISPR/Cas9
中图分类号：
作者姓名：
莫婷;张海涛;李苑琪;余华军;李国丹;魏婷;黄小琴;贾玉芳;涂名进;严秀文
作者机构：
广东医科大学生物化学与分子生物学研究所,广东 湛江 524023;广东医科大学生物多肽与蛋白质研究应用重点实验室,广东 湛江 524023;南方海洋科学与工程广东省实验室,广东 湛江 524023
文献出处：
引用格式：
[1]莫婷;张海涛;李苑琪;余华军;李国丹;魏婷;黄小琴;贾玉芳;涂名进;严秀文-.CRISPR/Cas9系统构建ROCK2基因敲除肺癌细胞系)[J].西部医学,2022(09):1260-1264,1271
A类：
B类：
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AB值：
0.256195
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