目的 探究铁死亡在压力诱导的椎间盘退变中的作用及其分子作用机制.方法 将髓核细胞分为对照组、加压组和加压+铁死亡抑制剂(Fer-1)组,采用CCK-8法检测细胞增殖活力,透射电镜观察细胞内部超微结构,丙二醛(MDA)试剂盒检测髓核细胞脂质氧化水平.运用免疫荧光染色和Western Blot检测髓核细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平;运用TargetScan 8.0预测与GPX4靶向结合的miRNA及其位点,并检测该miRNA在髓核细胞中的表达水平.结果 压力作用导致髓核细胞增殖活力下降,脂质氧化水平升高,线粒体萎缩且膜密度增高,而Fer-1可有效逆转压力对髓核细胞的上述作用.压力下调髓核细胞中GPX4蛋白表达,生物信息学预测结果显示miR-1224靶向结合于GPX4且RT-PCR结果显示压力上调髓核细胞中miR-1224的表达水平(P<0.05).抑制髓核细胞中的miR-1224可显著升高GPX4蛋白表达,并有效逆转压力诱导的髓核细胞表型退变及脂质氧化水平升高,过表达miR-1224则起到相反作用.结论 压力导致髓核细胞中的miR-1224表达水平升高,通过靶向结合抑制了GPX4蛋白的表达,从而促进髓核细胞铁死亡的发生并导致椎间盘退变.

铁死亡;椎间盘退变;miR-1224;谷胱甘肽过氧化物酶4

毛建鑫;高楚;尚启良;王栋;王迪;杜牧;杨柳;罗卓荆

第四军医大学附属西京医院骨科,西安710032;西北工业大学医学研究院,西安710072

骨科

[1]毛建鑫;高楚;尚启良;王栋;王迪;杜牧;杨柳;罗卓荆-.铁死亡在压力诱导的椎间盘退变中的作用及机制研究)[J].骨科,2022(06):527-534

椎间盘退变,分子作用机制,髓核细胞,Fer,CCK,细胞增殖活力,透射电镜,电镜观察,超微结构,试剂盒,脂质氧化,氧化水平,免疫荧光染色,Blot,中谷,谷胱甘肽过氧化物酶,GPX4,蛋白表达水平,TargetScan,miRNA,述作,细胞表型,过表达,反作用,细胞铁死亡

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