典型文献
长链非编码RNA NEAT1调控miR-486/FOXO1轴参与椎间盘髓核细胞退变的机制研究
文献摘要：
目的:明确长链非编码RNA核富集转录本1(lncRNA NEAT1),miR-486,FOX01之间的相互关系,探讨三者在椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)组织中的表达及相关性,阐明NEAT1通过调控miR-486/FOX01轴参与IDD进展的具体机制.方法:利用双荧光素酶报告基因、RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)试验等明确NEAT1,miR-486与叉头框蛋白01(forkhead box protein 01,FOXO1)的生物学关系;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、免疫印迹(Western blot)检测15例对照和30例IDD髓核组织中NEAT1,miR-486与FOXO1的表达,统计其与Pfirrmann分级的关系;采用白细胞介素13(interleukin-1β,IL-1β)诱导法构建髓核细胞退变模型,NEAT1小干扰RNA(NEAT1 small interfering RNA,si-NEAT1)和过表达质粒转染髓核细胞构建细胞沉默或过表达模型;细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和流式细胞术检测髓核细胞增殖和凋亡;RT-qPCR检测细胞NEAT1与miR-486表达;Western blot检测FOXO1 及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中聚集蛋白聚糖(aggrecan)、二型胶原(collagen Ⅱ)、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase,MMP-13)和含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样基质金属蛋白酶4(a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type 1 motifs 4,ADAMTS4)的表达.结果:NEAT1可通过碱基互补配对方式海绵吸附miR-486;miR-486靶向FOXO1的3'-非编码区(3'-UTR)抑制FOXO1蛋白表达.在IDD髓核组织中,NEAT1与FOXO1表达上调,与Pfirrmann分级呈显著正相关(P＜0.001);而miR-486表达下调,与Pfirrmann分级呈显著负相关(P＜0.001).分子细胞学实验证实,IL-1β诱导髓核细胞退变后,NEAT1的过表达进一步促进了髓核细胞凋亡(P＜0.01),加重了Aggrecan和Collagen Ⅱ的表达抑制(P＜0.01),增强了MMP-13和ADAMTS4的表达(P＜0.01);相比之下,NEAT1的沉默则逆转了髓核细胞凋亡(P＜0.01),有效恢复了Aggrecan和Collagen Ⅱ表达(P＜0.01),同时显著降低了MMP-13和ADAMTS4的表达(P＜0.01).结论:NEAT1调控miR-486/FOXO1分子轴并促进髓核细胞凋亡和ECM降解进而参与IDD病理机制过程.
文献关键词：
椎间盘退变;长链非编码RNA核富集转录本1;miR-486;FOXO1
中图分类号：
作者姓名：
柴星宇;宋将;朱静华;郝清海;袁崇明;刘涛
作者机构：
徐州医科大学附属滕州医院脊柱外科 277500滕州市
文献出处：
引用格式：
[1]柴星宇;宋将;朱静华;郝清海;袁崇明;刘涛-.长链非编码RNA NEAT1调控miR-486/FOXO1轴参与椎间盘髓核细胞退变的机制研究)[J].中国脊柱脊髓杂志,2022(07):639-647
A类：
FOX01
B类：
长链非编码,NEAT1,miR,FOXO1,椎间盘髓核,髓核细胞退变,转录本,lncRNA,椎间盘退变,intervertebral,disc,degeneration,IDD,具体机制,双荧光素酶报告基因,结合蛋白,免疫沉淀,binding,immunoprecipitation,RIP,叉头框蛋白,forkhead,box,实时荧光定量聚合酶链式反应,real,quantitative,polymerase,chain,reaction,qPCR,免疫印迹,blot,髓核组织,Pfirrmann,interleukin,诱导法,小干扰,small,interfering,过表达质粒,质粒转染,表达模型,试剂盒,counting,kit,CCK,流式细胞术,增殖和凋亡,细胞外基质,extracellular,matrix,ECM,聚集蛋白聚糖,aggrecan,collagen,基质金属蛋白酶,metalloproteinase,MMP,板结,基序,解聚,disintegrin,like,thrombospondin,type,motifs,ADAMTS4,碱基,补配,海绵吸附,非编码区,UTR,细胞学实验,Aggrecan,Collagen,表达抑制,相比之下,病理机制
AB值：
0.309119
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