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聚乙二醇沉淀富集和预扩增反转录实时定量聚合酶链式反应高灵敏检测小浆果中低浓度甲型肝炎病毒
文献摘要：
基于聚乙二醇沉淀富集和改进的预扩增反转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR),建立了高灵敏检测小浆果中低剂量感染甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)的方法.优化了聚乙二醇沉淀富集草莓中HAV的处理时间,探索设置预扩增步骤以加速样本核酸裂解和富集模板,建立了一种高灵敏的预扩增RT-qPCR检测新方法.回收率为15.51％,HAV减毒疫苗检测灵敏度可低至滴度4.49 CCID50/mL,检测HAV质粒的灵敏度低至3.5 copies/μL.与ISO/TS15216-2:2019标准方法相比,本方法具有更高的检测效率,适于对小浆果中微量污染HAV的检测.对78批市售小浆果样品中HAV的阳性检出率为5.13％,高于采用ISO/TS 15216-2:2019标准方法的检出率(1.28％).本方法对低剂量HAV病毒污染小浆果的检测具有很好的适用性和推广应用前景.
文献关键词：
小浆果;低剂量甲型肝炎病毒;聚乙二醇;预扩增实时定量聚合酶链式反应;检测
中图分类号：
作者姓名：
王娉;田卓;齐欣;郑秋月;胡冰;麻丽丹;杨莉莉;陈颖;曹际娟
作者机构：
中国检验检疫科学研究院,北京322001;大连民族大学生命科学学院,生物技术与资源利用教育部重点实验室,大连116600;大连海关技术中心,大连116001;辽宁师范大学生命科学学院,大连116023;丹东海关综合技术服务中心,丹东118017
文献出处：
引用格式：
[1]王娉;田卓;齐欣;郑秋月;胡冰;麻丽丹;杨莉莉;陈颖;曹际娟-.聚乙二醇沉淀富集和预扩增反转录实时定量聚合酶链式反应高灵敏检测小浆果中低浓度甲型肝炎病毒)[J].分析化学,2022(08):1168-1178
A类：
CCID50,TS15216,低剂量甲型肝炎病毒,预扩增实时定量聚合酶链式反应
B类：
聚乙二醇,醇沉,沉淀富集,高灵敏检测,小浆果,qPCR,量感,Hepatitis,virus,HAV,草莓,处理时间,减毒疫苗,检测灵敏度,滴度,质粒,copies,ISO,标准方法,检测效率,适于,市售,阳性检出率,病毒污染
AB值：
0.175385
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