典型文献
SMA模型小鼠骨髓间充质干细胞体外培养体系的建立
文献摘要：
目的 建立脊髓型肌萎缩症(SMA)小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)体外培养体系,研究反义寡核苷酸(ASO)对其生物学特性的影响,为深入研究SMA发病机制及药物筛选提供可靠的体内模拟工具细胞.方法 选取刚出生4 d的SMA小鼠,CO2 窒息法处死后,于75%乙醇中浸泡,分离、纯化骨髓细胞.细胞荧光检测细胞表面标志物;RT-PCR及Western Blot研究ASO对运动神经元存活基因2(SMN2)外显子(exon7)列入水平以及运动神经元存活(SMN)蛋白表达量;EDU法和TUNEL法检测细胞增殖和凋亡能力.结果 体外分离培养的SMA模型小鼠BMMSC具有贴壁生长、可以传代等特点;对P3代BMMSC进行细胞免疫荧光鉴定结果显示:CD44、CD29高表达,CD34、CD45低表达;转染ASO后细胞SMN2 exon7列入率显著上升以及SMN蛋白表达量显著上调,并显著促进细胞增殖能力,同时核内Gemini bodies(gems)数量也有所增多.结论 成功建立SMA小鼠BMMSC体外培养体系,通过阳性药物ASO验证可促进BMMSC SMN2 exon7列入及SMN蛋白表达,为SMN2相关调控机制及药物筛选提供一种新的工具细胞.
文献关键词：
SMA小鼠;骨髓间充质干细胞;ASO;运动神经元存活2基因;细胞增殖
中图分类号：
作者姓名：
陈志衡;吴刘成;景谨;朱顺星
作者机构：
南通大学实验动物中心,江苏 南通 226001;南通大学江苏省教育部神经再生重点实验室,江苏 南通 226001
文献出处：
引用格式：
[1]陈志衡;吴刘成;景谨;朱顺星-.SMA模型小鼠骨髓间充质干细胞体外培养体系的建立)[J].中国实验动物学报,2022(05):679-685
A类：
exon7,gems
B类：
SMA,模型小鼠,小鼠骨髓间充质干细胞,细胞体,体外培养体系,脊髓型,肌萎缩,BMMSC,反义寡核苷酸,ASO,生物学特性,药物筛选,内模,刚出生,窒息,处死,骨髓细胞,荧光检测,细胞表面,表面标志物,Blot,运动神经元存活基因,SMN2,外显子,EDU,TUNEL,增殖和凋亡,外分,分离培养,贴壁,传代,P3,细胞免疫,免疫荧光,CD44,CD29,CD34,CD45,低表达,转染,细胞增殖能力,Gemini,bodies,性药物,调控机制
AB值：
0.296908
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