典型文献
猕猴肺成纤维细胞的不同分离培养方法及鉴定比较
文献摘要：
目的 比较不同方法提取猕猴肺成纤维细胞的效率及对细胞相关功能的影响,为获得类似人肺成纤维细胞提供有效方法.方法 采用两种猕猴肺成纤维细胞的提取方法,组织块黏附法和胶原酶联合消化+组织黏附法.倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光鉴定猕猴肺成纤维细胞,CCK-8检测细胞活力,流式细胞仪检测肺成纤维细胞标志物 α-SMA的表达,凋亡试剂盒检测细胞凋亡,Western blot检测细胞 α-SMA蛋白水平表达.结果 组织黏附法贴壁的组织块72 h后可见小而亮的细胞爬出,4～5 d后细胞小范围爬出,呈长梭形;7d后可见细胞大范围爬出,形成单层细胞,传代后细胞均呈长梭形.用胶原酶联合消化+组织黏附法处理后24 h即可见小而亮的细胞从组织块中爬出,48 h后可见细胞大范围爬出,细胞呈长梭形;4～5d后可形成单层细胞,传代后的细胞均呈长梭形,用免疫荧光鉴定均表达 α-SMA.实验结果显示胶原酶联合消化+组织黏附法提取的肺成纤维细胞的活力明显高于组织黏附法所得细胞活力.TGF-β1刺激肺成纤维细胞后,胶原酶联合消化+组织黏附法提取的细胞增殖更快,α-SMA蛋白表达更高.结论 两种方法均能体外分离出猕猴肺成纤维细胞,胶原酶消化法提取猕猴肺成纤维细胞所需的时间较短且状态较好,TGF-β1刺激后相关蛋白水平表达更稳定,是获得猕猴肺成纤维细胞的有效方法,也是获得接近人原代肺成纤维细胞的有效方法.
文献关键词：
猕猴;肺;原代培养;肺成纤维细胞
中图分类号：
作者姓名：
许振;蒋海峰;张磊;刘潇一;董婷玉;檀学文;严尚学;常艳;魏伟
作者机构：
安徽医科大学临床药理研究所,合肥 230032
文献出处：
引用格式：
[1]许振;蒋海峰;张磊;刘潇一;董婷玉;檀学文;严尚学;常艳;魏伟-.猕猴肺成纤维细胞的不同分离培养方法及鉴定比较)[J].安徽医科大学学报,2022(07):1041-1047
A类：
B类：
猕猴,分离培养,培养方法,定比,不同方法,相关功能,人肺成纤维细胞,组织黏附,倒置,细胞形态,免疫荧光,CCK,细胞活力,流式细胞仪,SMA,试剂盒,blot,蛋白水平表达,贴壁,爬出,小范,7d,成单,单层细胞,传代,5d,TGF,外分,胶原酶消化法,更稳,原代培养
AB值：
0.185055
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
