目的 探究过表达microRNA-26a(miR-26a)的大鼠表皮干细胞(EPSC)来源外泌体(Exos)对深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合的影响.方法 体外培养大鼠EPSC,用携带miR-26a-绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒颗粒和阴性对照(NC-GFP)转染以上调miR-26a表达,并从未转染的EPSC、NC-GFP转染的EPSC或miR-26a-GFP转染的EPSC中分离Exos,透射电子显微镜(TEM)和纳米粒子追踪分析(NTA)观察Exos形态和大小,蛋白质印迹(Western blot)检测Exos表面标志物CD9、CD63和CD81的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测EPSC及EPSC-Exos中miR-26a表达,CCK-8法检测EPSC的增殖活性;小管形成实验评估miR-26a-EPSC-Exos对血管生成的影响.建立大鼠深Ⅱ度烧伤模型,分为对照组(control组)、NC-EPSC-Exos组和miR-26a-EPSC-Exos组,每组30只.NC-EPSC-Exos组和miR-26a-EPSC-Exos组大鼠给予相应的Exos干预,control组大鼠给予等体积的PBS,每周1次,持续3周.分别在烧伤后第7、14和21天,观察各组大鼠烧伤创面状况,计算创面愈合率;HE染色观察创面组织病理学变化,并进行组织学评分;免疫组织化学法检测创面CD31阳性表达,计算微血管密度(MVD).结果 miR-26a转染可显著升高EPSC及其Exos中miR-26a表达,促进EPSC细胞增殖(P<0.05);TEM和NTA分析结果显示,Exos呈球形,直径范围在40～150 nm,CD9、CD63和CD81均呈阳性;小管形成实验结果显示,miR-26a-EPSC-Exos可显著增加管长度,促进内皮细胞血管生成(P<0.05).体内动物实验结果显示,miR-26a-EPSC-Exos可显著加速深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合和修复,增加组织学评分和MVD(P<0.05).结论 过表达miR-26a的EPSC-Exos可促进深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合.

表皮干细胞;深Ⅱ度烧伤;外泌体;microRNA-26a;血管生成

王献珍;李毅;吴晓伟;崔强

青海大学附属医院,西宁 810000

中国比较医学杂志

[1]王献珍;李毅;吴晓伟;崔强-.过表达microRNA-26a大鼠表皮干细胞来源外泌体对深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合的影响)[J].中国比较医学杂志,2022(11):34-42,56

过表达,microRNA,26a,表皮干细胞,外泌体,miR,EPSC,Exos,体外培养,养大,绿色荧光蛋白,GFP,慢病毒颗粒,NC,转染,从未,透射电子显微镜,TEM,纳米粒子,粒子追踪,NTA,蛋白质印迹,blot,表面标志物,CD9,CD63,CD81,实时荧光定量聚合酶链反应,qPCR,CCK,增殖活性,实验评估,血管生成,control,PBS,烧伤创面,创面愈合率,HE,创面组织,组织病理学变化,免疫组织化学法,CD31,阳性表达,微血管密度,MVD,直径范围,管长,内皮细胞,动物实验,加组,进深

0.207161