目的:探讨蒙药七味清肝散在大鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)模型及肝星状细胞(HSC-T6)中的作用及机制.方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组及低剂量(135 mg/kg)、中剂量(270 mg/kg)和高剂量(405 mg/kg)七味清肝散组,每组6只.模型组和各给药组大鼠灌胃50％四氯化碳(CCl4)溶液(2 mL/kg),同时各给药组每天予以相应剂量的七味清肝散灌胃8周.采用全自动生化分析仪检测肝血清生化指标[丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)]及羟脯氨酸(HYP)含量;HE和Masson染色观察肝组织损伤情况;Western blot检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原蛋白(collagen type I,Col I)、磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)、PI3K及Akt蛋白表达水平.将HSC-T6细胞分组并进行miR-21模拟剂(mimics)/抑制剂(inhibi?tor)转染,MTT法检测细胞活力;RT-qPCR检测HSC-T6细胞中miR-21的表达水平,及细胞转染后对α-SMA、Col I、PTEN、PI3K和Akt mRNA表达水平的影响;Western blot检测HSC-T6细胞中α-SMA、Col I、PTEN、PI3K和Akt的蛋白表达水平.结果:不同剂量的七味清肝散能改善肝功能,并减轻肝纤维化程度;与模型组相比,各剂量给药组的细胞A值显著降低(P<0.05,P<0.01).七味清肝散显著下调HSC-T6细胞中miR-21表达(P<0.01);miR-21mimics显著升高α-SMA、Col I、PI3K和Akt的mRNA表达水平(P<0.01),下调PTEN的mRNA表达(P<0.05),而miR-21 inhibi?tor使上述指标mRNA表达水平显著逆转(P<0.05).七味清肝散处理后大鼠肝组织和HSC-T6细胞中α-SMA、Col I、PI3K及Akt蛋白水平下调,PTEN蛋白水平上调(P<0.05).结论:蒙药七味清肝散可能通过下调miR-21影响PTEN/PI3K/Akt信号通路来减轻大鼠的肝纤维化水平.

七味清肝散;肝纤维化;微小RNA-21;PTEN/PI3K/Akt信号通路

高晓阳;金蓉;颜羽昕;张春艳;赵晓璐;马月宏

内蒙古医科大学基础医学院,内蒙古呼和浩特010000

中国病理生理杂志

[1]高晓阳;金蓉;颜羽昕;张春艳;赵晓璐;马月宏-.基于体内外实验探讨蒙药七味清肝散对大鼠肝纤维化的作用及机制)[J].中国病理生理杂志,2022(11):2046-2054

七味清肝散,21mimics

体内外,蒙药,hepatic,fibrosis,HF,肝星状细胞,HSC,T6,Wistar,高剂量,药组,灌胃,四氯化碳,CCl4,全自动生化分析仪,血清生化指标,丙氨酸转氨酶,ALT,天冬氨酸转氨酶,AST,碱性磷酸酶,ALP,羟脯氨酸,HYP,HE,Masson,肝组织,组织损伤,伤情,blot,平滑肌肌动蛋白,SMA,胶原蛋白,collagen,type,Col,磷酸酶与张力蛋白同源物,PTEN,PI3K,Akt,蛋白表达水平,miR,模拟剂,inhibi,tor,MTT,细胞活力,qPCR,细胞转染,不同剂量,肝功能,肝纤维化程度

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