背景 与目的Y-box结合蛋白(YB1或YBX1)在肿瘤发生和癌症进展中发挥关键作用.然而,YB1是否可以通过调节非编码RNAs来影响肿瘤的恶性转化仍是未知的.本研究旨在探讨YB1与microRNAs之间的关系,并揭示YB1通过miRNAs介导的调控网络影响肿瘤进展的潜在机制.方法 通过细胞增殖、伤口愈合和Transwell侵袭实验,研究YB1在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中的生物学功能.在HCC细胞系中进行微阵列分析,筛选YB1引起失调的miRNAs.通过实时荧光定量PCR、双荧光素酶报告基因、RNA免疫沉淀和pull-down实验分析YB1对miR-205和miR-200b的调控.通过pull-down实验和免疫共沉淀实验确定了YB1、DGCR8、Dicer、TUT4和TUT1之间的关系.采用免疫荧光染色法检测YB1、DGCR8和Dicer的细胞共定位.通过BALB/c裸鼠尾静脉注射转染了YB1 shRNA或shControl的MHCC97H细胞,检测YB1在体内对肿瘤转移的影响.采用免疫印迹法和免疫组化法检测上皮细胞向间充质转化标志物的表达水平.结果 YB1不依赖Snail途径,通过调控miR-205/200b-ZEB1轴促进HCC细胞迁移和肿瘤转移.YB1与微处理器DGCR8和Dicer以及通过保守序列CSD(code shock domain)与尿苷酸末端转移酶TUT4及TUT1发生相互作用,抑制miR-205和miR-200b生物合成.随后,下调的miR-205和miR-200b增强了ZEB1的表达,从而促进细胞迁移和侵袭.此外,对肝癌细胞和正常肝组织的基因表达数据进行统计分析,发现YB1表达与ZEB1表达呈正相关,与临床预后显著相关.结论 本研究揭示了YB1通过调节肝癌细胞中miR-205/200b-ZEB1轴促进肿瘤进展的新机制.研究结果还表明,YB1可能通过miRNAs介导的基因调控来发挥其生物学功能,可作为治疗癌症的潜在靶点.

DGCR8机制;Dicer;肝癌;microRNA生物合成;YB1;ZEB1

刘秀梅;陈迪;陈欢;王稳;刘宇;王雅玮;段超;宁振;郭新;吾夏尔·乌提尔克;刘静;齐欢;刘晓龙;林爱福;夏天;刘宏旭;朴海龙

中国科学院分离分析化学重点实验室,中国科学院大连化学物理研究所,大连 116023,辽宁,中国;胸外科,辽宁省肿瘤医院肿瘤研究所,中国医科大学肿瘤医院,沈阳 110042,辽宁,中国;肝胆外科,大连医科大学第一附属医院,大连医科大学,大连116000,辽宁,中国;生命系统稳态与保护教育部重点实验室,生命科学学院,浙江大学,杭州 310058,浙江,中国;生物化学与分子生物学部,生命科学学院,中国医科大学,沈阳110122,辽宁,中国

癌症

[1]刘秀梅;陈迪;陈欢;王稳;刘宇;王雅玮;段超;宁振;郭新;吾夏尔·乌提尔克;刘静;齐欢;刘晓龙;林爱福;夏天;刘宏旭;朴海龙-.YB1在肝癌细胞中通过抑制microRNA生物合成调控miR-205/200b-ZEB1轴)[J].癌症,2022(12):565-585

TUT4,TUT1,上皮细胞向间充质转化

YB1,肝癌细胞,生物合成调控,200b,ZEB1,box,结合蛋白,YBX1,肿瘤发生,非编码,恶性转化,microRNAs,miRNAs,调控网络,网络影响,肿瘤进展,潜在机制,过细,伤口愈合,Transwell,hepatocellular,carcinoma,生物学功能,细胞系,微阵列分析,双荧光素酶报告基因,免疫沉淀,pull,down,免疫共沉淀,DGCR8,Dicer,免疫荧光染色法,共定位,BALB,裸鼠,鼠尾,尾静脉注射,转染,shRNA,shControl,MHCC97H,肿瘤转移,免疫印迹法,免疫组化法,不依,Snail,微处理器,保守序列,CSD,code,shock,domain,尿苷酸,转移酶,细胞迁移和侵袭,肝组织,基因表达数据,临床预后,基因调控,治疗癌症,潜在靶点

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