典型文献
穿膜肽钴原卟啉药物复合体对人晶状体上皮细胞的保护作用实验
文献摘要：
背景 细胞穿膜肽(cell-penetrating peptides,CPPs)是一类具有细胞膜穿透能力的多肽,可以作为药物载体携带大分子物质进入细胞,其因低毒性和多组织普适性广泛运用于医学成像和治疗的研究中.目的 构建穿膜肽钴原卟啉药物复合体(R6-CoPP),研究其生物相容性和减轻晶状体上皮细胞氧化应激损伤的作用.方法 采用Fmoc固相合成法,根据设计的序列合成寡聚精氨酸穿膜肽(R6),以脱水缩合法将其与钴原卟啉(cobalt protoporphyrin,CoPP)连接,使用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)进行标记.应用高效液相色谱仪和质谱仪测定其纯度和相对分子质量,利用扫描透射电镜(STEM)能谱面/线扫和激光纳米粒度电位测量仪观测其表征形貌、元素分布、粒子直径和表面电位;细胞流式仪和共聚焦显微镜观察R6-CoPP对体外培养的人晶状体上皮细胞系的穿膜效果;CCK-8法检测R6-CoPP对人晶状体上皮细胞系细胞活性的影响.利用H2O2构建晶状体上皮细胞氧化损伤模型,比较R6-CoPP与CoPP预处理对细胞凋亡的影响.结果 经高效液相色谱法鉴定R6-CoPP纯度为94.56％,质谱鉴定相对分子质量为2109.75,与预计相符,粒径为227.8 nm,表面电位为+13.9 mV,STEM能谱面扫显示R6-CoPP内有钴元素分布.R6-CoPP对细胞毒性较小,生物相容性好.细胞流式结果 显示穿膜肽药物孵育细胞2 h后荧光阳性细胞比例可达80％以上.共聚焦显微镜荧光显示孵育15 min后R6-CoPP已经穿越细胞膜进入细胞质,细胞荧光强度随孵育时间的增加而下降.与氧化损伤模型组相比,CoPP和R6-CoPP预处理后的细胞存活率明显提高(P<0.05).结论 穿膜肽药物复合体R6-CoPP生物相容性较好,具有较强的细胞膜穿透能力,体外实验显示其可减轻氧化损伤所致的晶状体上皮细胞凋亡.
文献关键词：
穿膜肽;血红素氧合酶1;抗氧化应激;人晶状体上皮细胞;细胞凋亡
中图分类号：
作者姓名：
刘雅婷;马天驹;叶子;李朝辉
作者机构：
解放军总医院第三医学中心眼科医学部,北京 100853
文献出处：
引用格式：
[1]刘雅婷;马天驹;叶子;李朝辉-.穿膜肽钴原卟啉药物复合体对人晶状体上皮细胞的保护作用实验)[J].解放军医学院学报,2022(06):686-692,710
A类：
CoPP
B类：
原卟啉,复合体,人晶状体上皮细胞,细胞穿膜肽,cell,penetrating,peptides,CPPs,细胞膜,多肽,药物载体,带大,大分子物质,低毒性,多组织,医学成像,R6,生物相容性,氧化应激损伤,Fmoc,固相合成法,寡聚,精氨酸,脱水缩合,cobalt,protoporphyrin,异硫氰酸荧光素,fluorescein,isothiocyanate,FITC,高效液相色谱仪,质谱仪,相对分子质量,扫描透射电镜,STEM,纳米粒,电位测量,测量仪,仪观,元素分布,粒子直径,表面电位,共聚焦显微镜,体外培养,细胞系,CCK,细胞活性,H2O2,细胞氧化损伤,损伤模型,高效液相色谱法,质谱鉴定,+13,mV,钴元素,细胞毒性,阳性细胞,细胞质,荧光强度,孵育时间,细胞存活率,体外实验,可减轻,血红素氧合酶,抗氧化应激
AB值：
0.2581
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