典型文献
树鼩睾丸间质细胞的分离培养及寨卡病毒感染特性的研究
文献摘要：
目的 建立树鼩原代睾丸间质细胞分离培养方法,探究寨卡病毒(Zika virus,Zikv)对该细胞的感染特性,为Zikv感染导致的睾丸损伤及不育提供研究基础.方法 3月龄的雄性树鼩0.4 mL 3％戊巴比妥钠麻醉处死后采集睾丸,采用IV胶原酶和胰蛋白酶联合消化法获得单细胞悬液,通过percoll密度梯度离心结合差异贴壁法对细胞进行纯化,3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)对细胞荧光染色鉴定,ELISA检测细胞分泌睾酮的能力;用Zikv感染树鼩睾丸间质细胞,并用对寨卡病毒易感的非洲绿猴肾细胞(Vero)作为对比参照,测定感染不同时间点的细胞及其培养上清液中病毒载量,镜下观察细胞病变,ELISA检测睾酮含量.结果 分离培养的睾丸间质细胞经3β-HSD鉴定阳性率高达98％以上,且增殖迅速,能够连续分泌睾酮,第4代睾丸间质细胞在0～24 h和24～48 h睾酮分泌量分别为1.253 ng/mL和1.163 ng/mL;用Zikv感染树鼩睾丸间质细胞,6 h内病毒拷贝数可达2.15×105 copies/mL,且感染48 h后基本丧失睾酮分泌能力,感染第3天可见明显的细胞病变.结论 成功建立树鼩睾丸间质细胞的分离培养方法,Zikv可感染树鼩睾丸间质细胞并能导致该细胞睾酮分泌功能缺失,为Zikv入侵生殖系统机制研究提供基础.
文献关键词：
树鼩;睾丸间质细胞;3β-HSD;睾酮水平;Zikv
中图分类号：
作者姓名：
邓伟;金亮子;奎秀莹;王文广;李娜;仝品芬;代解杰
作者机构：
中国医学科学院/北京协和医学院 医学生物学研究所,昆明 650031;云南大学生命科学学院,昆明 650091;昆明医科大学,昆明 650500
文献出处：
引用格式：
[1]邓伟;金亮子;奎秀莹;王文广;李娜;仝品芬;代解杰-.树鼩睾丸间质细胞的分离培养及寨卡病毒感染特性的研究)[J].中国比较医学杂志,2022(06):48-54
A类：
Zikv,percoll
B类：
树鼩,睾丸间质细胞,分离培养,寨卡病毒,感染特性,原代,细胞分离,培养方法,Zika,virus,睾丸损伤,伤及,不育,月龄,戊巴比妥钠,处死,IV,胶原酶,胰蛋白酶,消化法,单细胞悬液,密度梯度,心结,贴壁,类固醇,醇脱氢酶,HSD,荧光染色,肾细胞,Vero,不同时间点,养上,上清液,病毒载量,细胞病变,分泌量,拷贝数,copies,分泌功能,生殖系统,系统机制,睾酮水平
AB值：
0.263847
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