目的:探讨Notch3在小鼠胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)激活中的作用机制.方法:原代分离培养小鼠PSCs并用油红O染色鉴定,细胞分组为空白对照组、阴性对照siRNA组、Notch3 siRNA组、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)组及Notch3 siRNA+TGFβ1组.应用RNA测序检测Notch3基因对其他信号通路的影响;应用免疫组织化学检测Notch3与TGFβ1在人胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcino?ma,PDAC)间质及癌旁组织中的表达情况;应用免疫荧光双标法检测Notch3和TGFβ1在PDAC间质的共表达情况;应用Western blot检测Notch3和TGFβ1在空白对照组和Notch3 siRNA组小鼠PSCs中的表达;应用Western blot检测Notch3基因敲减和TGFβ1诱导对活化的PSCs中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤连蛋白(fibronectin)和I型胶原(collagen type I,Col I)蛋白表达的影响;应用划痕实验和CCK-8实验检测Notch3基因敲减和TGFβ1诱导对小鼠PSCs迁移和活力的影响.结果:RNA测序和Western blot结果显示,敲减小鼠PSCs中Notch3基因表达可抑制TGFB1基因和TGFβ1蛋白表达;免疫组化和免疫荧光双标染色结果显示,Notch3和TGFβ1共表达于人PDAC间质细胞中;与Notch3 siRNA组相比,Notch3 siRNA+TGFβ1组小鼠PSCs中fibronectin和Col I蛋白表达显著升高(P<0.05),且PSCs活力和迁移能力显著提高(P<0.01).结论:抑制小鼠PSCs中Notch3基因的表达,同时给予TGFβ1诱导,可提高小鼠PSCs的迁移能力和活力.Notch3对PSCs激活的调节作用部分依赖TGFβ1信号通路.

Notch3蛋白;转化生长因子β1;胰腺导管腺癌;胰腺星状细胞

宋海岩;张毅敏;孙春莉

新乡医学院基础医学院,河南新乡453003

中国病理生理杂志

[1]宋海岩;张毅敏;孙春莉-.Notch3通过TGFβ1信号通路参与调节小鼠胰腺星状细胞的激活)[J].中国病理生理杂志,2022(06):1083-1090

siRNA+TGF

Notch3,胰腺星状细胞,pancreatic,stellate,cells,PSCs,原代,分离培养,用油,空白对照,转化生长因子,transforming,growth,免疫组织化学检测,胰腺导管腺癌,ductal,adenocarcino,ma,PDAC,癌旁组织,免疫荧光,共表达,blot,基因敲减,平滑肌肌动蛋白,smooth,muscle,actin,SMA,纤连蛋白,fibronectin,collagen,type,Col,划痕实验,CCK,实验检测,可抑制,TGFB1,免疫组化,染色结果,间质细胞,迁移能力,高小

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