目的 探究非诺贝特(Fen)对急性肺损伤(ALI)的作用及机制.方法(1)体内实验.30只C57BL/6雄性小鼠采用随机数字表法分成6组:正常组,模型组(LPS组),阳性药地塞米松(DXMS)组,Fen低、中、高剂量(20、40、80 mg/kg)组.分组给药12 h后,收集肺泡灌洗液(BALF),处死小鼠,获取肺组织,记录肺组织湿/干质量比;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-1β含量;BCA比色法和瑞氏-吉姆萨染色检测BALF中总蛋白含量和免疫细胞数目;苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病变并进行病理评分.Western blot检测肺组织B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)表达.(2)体外实验.实验设Control、LPS(10 mg/L)、LPS+Fen(5μmol/L)、LPS+Fen(10μmol/L)、LPS+Fen(20μmol/L)组.A549细胞经LPS(10 mg/L)处理后分别加入5、10、20μmol/L的Fen处理12 h,分别用DCFH-DA、Annexin V-FITC/PI法和Western blot检测Fen对A549细胞ROS、凋亡和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及p-JNK影响.另选取LPS(10 mg/L)+Fen(20μmol/L)处理后添加H2O2(100μmol/L),观察细胞ROS、凋亡率和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达变化.此外,选取LPS(10 mg/L)+Fen(20μmol/L)处理后添加JNK激动剂Anisomycin(3μmol/L),观察Bcl-2、Bax表达变化.结果(1)与正常组相比,模型组小鼠肺组织湿/干质量比,肺组织损伤评分,TNF-α、IL-6、IL-1β含量,肺泡灌洗液总蛋白含量,免疫细胞数目,p-JNK和Bax表达均出现显著升高,Bcl-2表达显著降低.与模型组相比,Fen低、中、高剂量组上述指标变化均被逆转.(2)Fen能显著减少LPS诱导的A549细胞ROS含量,降低凋亡率,抑制p-JNK和Bax表达并促进Bcl-2表达.H2O2可逆转Fen引起的上述效应.Anisomycin也能抑制Fen引起的Bcl-2上调和Bax蛋白下调.结论 Fen可通过ROS/JNK信号抑制细胞凋亡,从而减轻ALI.

急性肺损伤;非诺贝特;脂多糖类;活性氧;JNK丝裂原活化蛋白激酶类;细胞凋亡;小鼠;近交C57BL;A549细胞

董超;李华宇;区豪杰;孙嘉;张陆勇;刘冰

广东药科大学药学院 510006;广东药科大学 新药研发中心 510006

天津医药

[1]董超;李华宇;区豪杰;孙嘉;张陆勇;刘冰-.非诺贝特改善脂多糖诱导的急性肺损伤及其机制研究)[J].天津医药,2022(01):59-66

DXMS,LPS+Fen,+Fen

非诺贝特,急性肺损伤,伤及,ALI,体内实验,C57BL,雄性小鼠,地塞米松,高剂量,肺泡灌洗液,BALF,处死,干质量,酶联免疫吸附试验,BCA,比色法,吉姆,总蛋白,蛋白含量,免疫细胞,苏木,木精,伊红,HE,组织病变,病理评分,blot,Bcl,Bax,Jun,JNK,磷酸化,体外实验,Control,A549,别加,DCFH,DA,Annexin,FITC,ROS,凋亡相关蛋白,另选,H2O2,凋亡率,表达变化,激动剂,Anisomycin,肺组织损伤,指标变化,信号抑制,脂多糖类,丝裂原活化蛋白激酶,蛋白激酶类,近交

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