目的 探讨circPDE4B调控miR-7对骨关节炎(osteoarthritis,OA)中软骨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解和凋亡的影响及机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测circPDE4B和miR-7在OA软骨组织和软骨细胞中的表达水平.在OA软骨细胞中分别转染 oe-NC 和 oe-circPDE4B,或者转染 si-NC、si-circPDE4B 和共转染 si-circPDE4B+miR-7 inhibitors后,RT-qPCR和免疫蛋白印迹(western blot,WB)检测ECM相关分子SOX9、CO)L2A1、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)3和MMP13的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况.采用双荧光素酶报告基因检测circPDE4B和miR-7的结合情况.结果 circPDE4B的表达水平在OA软骨组织和软骨细胞中明显低于正常软骨组织和软骨细胞(P＜0.05).过表达circPDE4B能够明显抑制OA软骨细胞的凋亡和凋亡相关分子Cleaved-caspase-3蛋白的表达水平(P＜0.05).同时,过表达circPDE4B能够明显促进SOX9和COL2A1的表达水平(P＜0.05),抑制MMP3和MMP13的表达水平(P＜0.05).荧光素酶报告基因检测结果显示circPDE4B能够靶向结合miR-7(P＜0.05),过表达circPDE4B能够抑制miR-7的表达(P＜0.05).circPDE4B和miR-7在OA患者软骨组织中的表达水平呈负相关(P＜0.05).共转染si-circPDE4B和miR-7 inhibitors能够反转单独转染si-circPDE4B对OA软骨细胞凋亡和软骨ECM降解的促进作用(P＞0.05).结论 circPDE4B在OA软骨组织和软骨细胞中明显低表达,circPDE4B能够通过靶向结合miR-7抑制OA软骨细胞凋亡和软骨ECM降解.

骨关节炎;circPDE4B;miR-7;细胞外基质;凋亡

范金柱;任小宇;从飞;宋涛;郭云山;马强

西安交通大学附属红会医院骨显微修复外科,陕西西安 710054;西安交通大学附属红会医院脊柱外科,陕西 西安 710054;西安交通大学附属红会医院足踝外科,陕西 西安 710054

实用骨科杂志

[1]范金柱;任小宇;从飞;宋涛;郭云山;马强-.circPDE4B调控miR-7对骨关节炎中软骨ECM降解和细胞凋亡的影响)[J].实用骨科杂志,2022(06):512-517

circPDE4B,circPDE4B+miR,L2A1

骨关节炎,中软,ECM,osteoarthritis,OA,细胞外基质,extracellular,matrix,实时荧光定量聚合酶链式反应,real,quantitative,polymerase,chain,reaction,qPCR,软骨组织,oe,NC,si,共转染,inhibitors,免疫蛋白印迹,western,blot,WB,SOX9,基质金属蛋白酶,metalloproteinase,MMP13,流式细胞术,双荧光素酶报告基因,基因检测,低于正常,过表达,Cleaved,caspase,COL2A1,MMP3,软骨细胞凋亡,低表达

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