目的 探索牙本质基质蛋白(dentin matrix protein,DMP)-1基因对骨关节炎(osteoarthritis,OA)中软骨细胞的作用.方法 Affymetrix微阵列分析OA大鼠模型中软骨细胞中DMP-1的水平;建立OA体外模型并分离和培养软骨细胞;DMP-1基因转染软骨细胞;采用细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK-8)法检测DMP-1对软骨细胞增殖的影响;酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immuno sorbent assay,ELISA)法检测软骨细胞糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)分泌情况和促炎细胞因子[白细胞介素(interleukin,IL)-6和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-a]的水平;免疫荧光观察Col2a1的表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测 DMP-l、Sox9、Acan、Col2a1 基因的表达水平;蛋白质印迹法(western blot,WB)定量分析DMP-1、Sox9、Acan、Col2a1;流式细胞仪和活细胞/死细胞双染(Calcein-AM/PI)染色检测DMP-1对软骨细胞抗凋亡能力的影响.结果 OA的体内模型中微阵列分析DMP-1表达水平低于对照组(P＜0.05);体外OA模型的软骨细胞中DMP-1表达水平低于对照组(P＜0.001);转染DMP-1质粒后,软骨细胞及IL-1β处理的软骨细胞的DMP-1表达水平高于未转染组,IL-1β处理的软骨细胞的活力高于未转染组(P＜0.001);IL-1β诱导的转染DMP-1软骨细胞GAG表达情况、Col2a1免疫荧光表达情况明显低于未转染组,Sox9、Acan、Col2a1表达水平明显低于未转染组(P＜0.001);IL-1β诱导的转染DMP-1软骨细胞分泌IL-6、TNF-α水平和细胞凋亡情况明显低于未转染组(P＜0.001).结论 DMP-1可以用来转染软骨细胞,减轻OA的进展.

牙本质基质蛋白-1;软骨细胞;炎症;骨关节炎

鲁斌;程加峰;汪洋;冀林;王岩松;赵平

芜湖市第一人民医院骨一科,安徽芜湖 241000;哈尔滨市第一医院骨一科,黑龙江哈尔滨 150081;哈尔滨医科大学附属第一医院脊柱外科,黑龙江哈尔滨 150081

实用骨科杂志

[1]鲁斌;程加峰;汪洋;冀林;王岩松;赵平-.牙本质基质蛋白-1对白细胞介素-1β诱导的大鼠软骨细胞炎症损伤的研究)[J].实用骨科杂志,2022(11):991-996

glycosaminoglycan

牙本质,基质蛋白,软骨细胞,细胞炎症,炎症损伤,dentin,matrix,protein,DMP,骨关节炎,osteoarthritis,OA,中软,Affymetrix,微阵列分析,大鼠模型,体外模型,基因转染,cell,counting,kit,CCK,酶联免疫吸附,免疫吸附剂,enzyme,linked,immuno,sorbent,assay,糖胺聚糖,GAG,促炎细胞因子,interleukin,tumor,necrosis,免疫荧光,Col2a1,实时荧光定量聚合酶链式反应,real,quantitative,polymerase,chain,reaction,qPCR,Sox9,Acan,蛋白质印迹法,western,blot,WB,流式细胞仪,活细胞,Calcein,AM,抗凋亡,体内模型,质粒,光表

0.274864