目的 初步探索蒲公英甾醇治疗大鼠膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用机制.方法 采用4％木瓜蛋白酶溶液+0.03 mmol/L半胱氨酸混合液0.2 mL关节腔内注射制备KOA大鼠模型,分别给予蒲公英甾醇2.5 mg/kg(低剂量组)、5 mg/kg(中剂量组)、10 mg/kg(高剂量组)及生理盐水(模型组)灌胃,关节腔注射生理盐水0.2 mL制备假手术组,给予生理盐水灌胃;给药4周后,用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1、MMP-3、半胱氨酸蛋白酶-1(cysteine aspartic acid protease,Capase-1)水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法测定关节软骨组织中微小 RNA(microRNA,miRNA)-140、miRNA-146a表达水平,采用Western blot法测定软骨组织中的核因子κB抑制因子(inhibitor of NF-κB,IκB)、IκB激酶β(inhibitor κB kinase β,IKKβ)、核因子 κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、转化生长因子 β 活化激酶 1(transforming growth factor-β-activated kinase 1,TAK1)、NOD样受体家族 3(NOD-like receptors 3,NLRP3)、凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)表达水平;对关节软骨组织进行病理观察.结果 与假手术组比较,高、中、低剂量组及模型组的血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-1、MMP-3、Capase-1水平及关节软骨组织中IκB、IKKβ、NF-κB、TAK1、NLRP3、ASC蛋白表达水平、Mankin评分均明显增高(P＜0.05),关节软骨组织中miRNA-140、miRNA-146a表达水平均明显降低(P＜0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组的血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-1、MMP-3、Capase-1 水平及关节软骨组织中 IκB、IKKβ、NF-κB、TAK1、NLRP3、ASC 蛋白表达水平、Mankin评分均明显降低(P＜0.05),并且随着剂量的增加而明显降低(P＜0.05),关节软骨组织中miRNA-140、miRNA-146a表达水平均明显增高(P＜0.05),并且随着剂量的增加而明显增高(P＜0.05).结论 蒲公英甾醇对大鼠KOA具有保护作用,能减轻关节软骨组织的病理学改变,且呈剂量依赖性,其作用机制可能与炎症抑制、miRNA表达上调及TAK1/NF-κB、NLRP3信号通路活化受阻有关.

膝关节骨关节炎;大鼠;蒲公英甾醇;炎性因子;信号通路;微小RNA;作用机制

谢子康;史铭钰;蒋阳;王斌;沈鹏飞;郑冲;杨晓峰

常州市中医医院骨一科,江苏常州 213000

实用骨科杂志

[1]谢子康;史铭钰;蒋阳;王斌;沈鹏飞;郑冲;杨晓峰-.蒲公英甾醇治疗大鼠膝关节骨关节炎的作用机制初步探索)[J].实用骨科杂志,2022(05):416-421

蒲公英甾醇,Capase

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