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典型文献
叠氮溴化丙锭与实时荧光定量PCR结合检测地衣芽孢杆菌活菌制品中金黄色葡萄球菌
文献摘要:
目的 排除样品中高浓度活菌和大量辅料及死菌DNA的干扰,检测地衣芽孢杆菌活菌胶囊中金黄色葡萄球菌.方法 将叠氮溴化丙锭(PMA)、实时荧光定量PCR(qPCR)和微孔膜过滤法相结合,收集滤液后离心,富集菌体,优化PMA工作浓度、暗孵育时间和曝光时间,确定PMA最佳处理方案.采用不同浓度金黄色葡萄球菌的死菌与活菌进行PMA-qPCR方法验证,同时考察方法灵敏度和特异性.结果 样品采用5.0μm的聚醚砜膜过滤,辅料截留率和滤液活菌计数最高.PMA工作质量浓度40 μg· mL-1,暗孵育时间10 min,曝光时间10 min为最佳处理方案,该处理方案下PMA既不影响活菌DNA的PCR扩增,又能进入死菌中结合DNA抑制其扩增.本法高效快速、实时准确,全过程筛选鉴定只需4h,最低检测限为1 ×104 CFU· mL-1.结论 本法灵敏度高、特异性强,适用于地衣芽孢杆菌活菌制品中金黄色葡萄球菌的检测.
文献关键词:
叠氮溴化丙锭;实时荧光定量PCR;微生态活菌制品;地衣芽孢杆菌活菌胶囊;金黄色葡萄球菌
作者姓名:
王银环;郑小玲;阮昊;贾晓力
作者机构:
浙江省食品药品检验研究院,杭州310004;国家药品监督管理局药品微生物检测与预警重点实验室,杭州310004;济南职业学院,济南250000
文献出处:
引用格式:
[1]王银环;郑小玲;阮昊;贾晓力-.叠氮溴化丙锭与实时荧光定量PCR结合检测地衣芽孢杆菌活菌制品中金黄色葡萄球菌)[J].中国药学杂志,2022(03):231-236
A类:
B类:
叠氮溴化丙锭,测地,中金,金黄色葡萄球菌,辅料,地衣芽孢杆菌活菌胶囊,囊中,PMA,qPCR,微孔膜,膜过滤,过滤法,滤液,菌体,孵育时间,曝光时间,处理方案,方法验证,聚醚砜膜,截留率,活菌计数,该处,本法,高效快速,筛选鉴定,4h,检测限,CFU,灵敏度高,微生态活菌制品
AB值:
0.231561
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