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基于巢式PCR方法联合Sanger测序技术对大黄廑虫丸中水蛭成分真伪的鉴定
文献摘要：
目的 基于DNA条形码技术建立一种可以实现对大黄麈虫丸中水蛭成分真伪品鉴定的方法.方法 首先以CO Ⅰ通用引物对大黄座虫丸中成药DNA进行一轮聚合酶链式反应(PCR)扩增,随后采用自行设计和筛选出的水蛭通用引物对一轮PCR反应液进行二轮PCR扩增,联合Sanger测序技术,对二轮PCR扩增产物测序,最后对测序结果峰图采用seqman软件进行序列拼接,将拼接后的DNA序列在NCBI数据库中用BLAST在线比对软件进行比对判定,进而鉴定水蛭成分真伪.结果 本实验建立的巢氏PCR方法联合Sanger测序技术通过了对9份经CO Ⅰ通用引物鉴定的水蛭干药材的验证,结果验证两方法鉴定结果一致.同时采用本研究建立的巢氏PCR方法联合Sanger测序技术对收集的14批大黄座虫丸进行鉴定,共有5批鉴定出含有伪品水蛭成分.结论 本实验建立的的巢氏PCR方法联合Sanger测序技术能够实现对大黄?虫丸中水蛭成分真伪品的鉴定,对中成药的质量控制具有一定的意义.
文献关键词：
巢氏PCR;DNA条形码;中成药;中药鉴定;水蛭;大黄?虫丸
中图分类号：
作者姓名：
陶静;丁威;韩蓉;孙万平
作者机构：
苏州大学药学院分子诊断实验室,江苏苏州215000;苏州普瑞姆生物科技有限公司,江苏苏州215000
文献出处：
引用格式：
[1]陶静;丁威;韩蓉;孙万平-.基于巢式PCR方法联合Sanger测序技术对大黄廑虫丸中水蛭成分真伪的鉴定)[J].中国药学杂志,2022(01):30-37
A类：
seqman
B类：
Sanger,大黄,水蛭,真伪,条形码技术,伪品鉴定,先以,通用引物,中成药,聚合酶链式反应,自行设计,二轮,扩增产物,拼接,NCBI,BLAST,中药鉴定
AB值：
0.186302
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