典型文献
葛根素单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法建立
文献摘要：
采用过碘酸盐氧化法,将葛根素半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,得到免疫抗原葛根素-BSA和包被抗原葛根素-OVA.葛根素-BSA常规免疫程序免疫BALB/c小鼠,3次免疫后检测小鼠血清的效价和特异性.加强免疫后取小鼠脾脏淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,采用单克隆抗体筛选技术,筛选得到抗葛根素单克隆抗体杂交瘤细胞株24株.制备腹水并纯化后,其中抗葛根素单克隆抗体M1与4'-甲氧基葛根素、大豆苷、葛根素-6″-O-木糖苷、大豆苷元、葛根素芹菜糖苷、3'-甲氧基葛根素和3'-羟基葛根素的交叉反应率分别为239.84％、112.18％、67.89％、58.28％、22.37％、0.40％、0.20％,与黄芩素和黄芩苷等其他化合物的交叉反应率均＜0.10％.基于抗葛根素单克隆抗体的间接竞争酶联免疫分析方法(icELISA)的IC50为44.80 ng·mL-1,检测范围为8.20～292.30 ng·mL-1,加样回收率为91.95％～98.20％,变异系数为0.70％～2.60％.利用所建立的icELISA测定了6批葛根类药材中葛根素的含量,并用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS)进行验证,两方法的相关性为0.9990,表明所建立的icELISA可以用于葛根和粉葛中葛根素含量的快速检测.
文献关键词：
葛根素;单克隆抗体;中药;酶联免疫分析法
中图分类号：
作者姓名：
魏文斌;岳世彦;周荣荣;南铁贵;陈敏;袁媛
作者机构：
中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地,北京100700
文献出处：
引用格式：
[1]魏文斌;岳世彦;周荣荣;南铁贵;陈敏;袁媛-.葛根素单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法建立)[J].中国中药杂志,2022(01):48-53
A类：
抗体筛选技术,icELISA
B类：
单克隆抗体的制备,免疫分析方法,碘酸,氧化法,半抗原,牛血清蛋白,BSA,卵清蛋白,OVA,偶联,包被抗原,常规免疫,免疫程序,BALB,小鼠血清,效价,加强免疫,脾脏淋巴细胞,骨髓瘤细胞,细胞融合,选得,杂交瘤细胞株,腹水,M1,甲氧基,木糖,大豆苷元,葛根素芹菜糖苷,交叉反应,反应率,黄芩素,黄芩苷,间接竞争,IC50,检测范围,超高效液相色谱,串联质谱,UPLC,粉葛,葛根素含量,快速检测,酶联免疫分析法
AB值：
0.262278
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