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禽多杀性巴氏杆菌C48-1株胞外分泌蛋白的DNase活性分析
文献摘要：
为探究多杀性巴氏杆菌(Pm)胞外分泌蛋白的DNase活性及对该蛋白DNase活性影响的因素,本研究经琼脂培养法以λDNA为底物鉴定禽Pm C48-1株胞外蛋白的DNase活性,将Pm培养5 h后采用低温透析法收集禽Pm C48-1株的胞外分泌蛋白,并采用BCA试剂盒测定其浓度,进一步利用Kunitz法检测Pm胞外分泌蛋白的DNase活性.结果显示,禽Pm分泌的胞外蛋白能够降解λDNA,即其有DNase活性,且获得的胞外分泌蛋白的浓度为1.32μg/mL,其降解λDNA的活性水平为6.07×106 Kunitz Unit/mg.利用琼脂糖凝胶电泳法检测胞外分泌蛋白降解不同底物DNA的能力以及酸碱、温度和不同浓度金属阳离子对胞外分泌蛋白降解λDNA活性的影响.结果显示,Pm胞外分泌蛋白的DNase活性具有广谱性,可降解λDNA、细菌基因组DNA、质粒DNA和PCR扩增的DNA片段.DNase活性影响因素的检测结果显示,Pm胞外分泌蛋白降解λDNA的最适温度为30℃,在pH7.0～pH9.0时该蛋白的DNase活性较好,而在酸性和强碱性时该蛋白则无DNase活性.不同浓度的Na+、K+和Ba2+对胞外分泌蛋白的DNase活性均无明显影响;不同浓度的Ca2+、Mg2+和Mn2+可提高胞外分泌蛋白的DNase活性;1 mmol/L和5 mmol/L的Co2+以及0.01 mmol/L和0.1 mmol/L的Cu2+则可抑制该蛋白的DNase活性,而1 mmol/L和5 mmol/L的Cu2+则对该蛋白的DNase活性无明显影响.本研究首次证实了禽Pm C48-1株胞外分泌蛋白的DNase活性,且该活性具有广谱性,并明确了影响该活性的因素,为进一步探究胞外DNase在Pm感染及与宿主互作中的作用提供参考.
文献关键词：
多杀性巴氏杆菌;C48-1株;分泌蛋白;DNase;胞外核酸酶
中图分类号：
作者姓名：
陈耀华;董何凡;李琦;牛俊辉;钱满;王晓利;全映颖;刘桂坤;雷显前;程相朝;廖成水
作者机构：
河南科技大学动物科技学院,河南 洛阳 471023;洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室,河南 洛阳 471023
文献出处：
引用格式：
[1]陈耀华;董何凡;李琦;牛俊辉;钱满;王晓利;全映颖;刘桂坤;雷显前;程相朝;廖成水-.禽多杀性巴氏杆菌C48-1株胞外分泌蛋白的DNase活性分析)[J].中国预防兽医学报,2022(09):984-989
A类：
禽多杀性巴氏杆菌,胞外核酸酶
B类：
C48,胞外分泌,分泌蛋白,DNase,活性分析,Pm,琼脂培养法,底物,低温透析,透析法,BCA,试剂盒,Kunitz,活性水,Unit,琼脂糖凝胶电泳,蛋白降解,酸碱,金属阳离子,离子对,广谱性,可降解,细菌基因组,质粒,pH7,pH9,强碱,Na+,K+,Ba2+,Ca2+,Mg2+,Mn2+,Co2+,Cu2+,可抑制,宿主
AB值：
0.187466
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