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典型文献
鲍曼不动杆菌Hcp基因原核表达载体的构建及蛋白纯化
文献摘要:
目的 获取鲍曼不动杆菌Ⅵ型分泌系统(T6SS)核心组分溶血素共调节蛋白(Hcp).方法 根据ATCC17978菌株Hcp基因序列设计并合成一对含XhoⅠ和NcoⅠ酶切位点的特异性引物,利用PCR方法扩增Hcp基因全长,定向克隆至含His标签的pET-28a(+)载体,采用PCR、双酶切和测序技术验证载体是否构建成功,进而转化Escherichia coli(E.coli)BL21(DE3)菌株,以IPTG诱导表达Hcp蛋白,分析目的蛋白的表达方式及最佳表达条件,通过Western blot鉴定目的蛋白,超滤管浓缩并保存.结果 获得了预期500bp左右的Hcp基因,并成功克隆至pET-28a(+)质粒,经IPTG诱导表达,成功纯化出Hcp融合蛋白.结论 成功获得鲍曼不动杆菌Hcp基因的原核表达产物,为深入研究T6SS及Hcp奠定了基础.
文献关键词:
T6SS;鲍曼不动杆菌;Hcp基因;原核表达;蛋白纯化
作者姓名:
胡音音;杜伟鹏;张亚东;卢庆文;李向阳
作者机构:
南阳市中心医院检验科,河南 南阳 473009;南阳市中心医院肝脏外科,河南 南阳 473009;温州医科大学附属第二医院育英儿童医院,浙江 温州 325027
文献出处:
引用格式:
[1]胡音音;杜伟鹏;张亚东;卢庆文;李向阳-.鲍曼不动杆菌Hcp基因原核表达载体的构建及蛋白纯化)[J].实验与检验医学,2022(02):192-195
A类:
ATCC17978,Nco,500bp
B类:
鲍曼不动杆菌,Hcp,原核表达载体,蛋白纯化,分泌系统,T6SS,溶血素,调节蛋白,基因序列,序列设计,并合,Xho,酶切位点,特异性引物,全长,定向克隆,His,pET,28a,双酶,技术验证,Escherichia,coli,BL21,DE3,IPTG,诱导表达,目的蛋白,表达方式,blot,超滤管,缩并,质粒,融合蛋白,达产
AB值:
0.339523
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