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原代正常宫颈及宫颈癌细胞的培养方法
文献摘要：
目的 探讨一种高效、可重复的宫颈上皮细胞原代培养方法.方法 本研究选取4例正常宫颈组织和4例宫颈鳞状细胞癌组织,并分别采用Ⅱ型中性蛋白酶联合0.25％胰蛋白酶-EDTA?(中性蛋白酶联合法)?及Ⅰ型胶原酶消化法分离后进行原代培养.通过CD326、P40以及Ki-67+P16双染进行免疫荧光染色鉴定细胞来源.结果 正常宫颈上皮细胞原代培养14?d,汇合度可达70％～80％,传代可至4～5代,且荧光染色CD326、P40均表达强阳性,P16表达弱阳性,Ki-67仅在个别细胞核中表达;宫颈鳞状细胞癌细胞原代培养14?d,汇合度可达70％～80％,传代可至5～6代,荧光染色CD326和P40均表达强阳性,P16表达阳性,Ki-67广泛表达于细胞核.结论 Ⅱ型中性蛋白酶联合0.25％胰蛋白酶-EDTA分离法及5％FBS的KFSM培养基可高效、多次重复原代培养正常宫颈上皮细胞;Ⅰ型胶原酶消化分离法及5％FBS的KFSM培养基培养可高效、多次重复原代培养宫颈鳞状细胞癌细胞.
文献关键词：
正常宫颈组织;宫颈癌组织;原代细胞培养
中图分类号：
作者姓名：
吴思;路一平;王馨艺;孙峥嵘
作者机构：
中国医科大学附属盛京医院生物样本库,沈阳 110004
文献出处：
引用格式：
[1]吴思;路一平;王馨艺;孙峥嵘-.原代正常宫颈及宫颈癌细胞的培养方法)[J].中国医科大学学报,2022(11):965-969
A类：
CD326,67+P16,KFSM
B类：
宫颈癌细胞,培养方法,可重复,宫颈上皮细胞,原代培养,正常宫颈组织,宫颈鳞状细胞癌,中性蛋白酶,胰蛋白酶,EDTA,胶原酶消化法,P40,Ki,免疫荧光染色,汇合,传代,弱阳性,细胞核,表达阳性,分离法,FBS,多次重复,复原,养正,宫颈癌组织,原代细胞培养
AB值：
0.197269
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