典型文献
金水缓纤组分方Ⅱ通过调控SETDB1/Snai1表观抑制A549细胞上皮间质转化
文献摘要：
目的:基于蛋白赖氨酸N端甲基转移酶SET结构域分支型组1(SET domain,bifurcated 1,SETDB1)表观调控锌指转录因子 1(snail family zinc finger 1,Snai1),探讨金水缓纤组分方 Ⅱ(effective-component compatibility of Jinshui Huanxian formula Ⅱ,ECC-JHF Ⅱ)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的 A549 细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的调控作用.方法:体外培养A549细胞,通过细胞活性检测试剂盒(cell counting Kit-8,CCK8)检测细胞活力;Western Blot 检测 E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN1)、波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平以筛选ECC-JHF Ⅱ的最佳作用浓度;将A549细胞分为空白组、TGF-β1组、ECC-JHF Ⅱ组和吡非尼酮(pirfenidone,PFD)组,药物干预后,Western Blot检测SETDB1、组蛋白H3第9位点赖氨酸三甲基化(histone H3 lysine 9 trimethylation,H3K9me3)、E-cadherin、N-cadherin、α-SMA、Vimentin、FN1 及 Snai1 的蛋白表达水平;通过 siRNA 转染技术敲低 A549细胞SETDB1表达,检测EMT相关蛋白表达水平考察SETDB1在金水缓纤组分方Ⅱ抑制EMT过程中的作用;将A549细胞分为空白组、TGF-β1组、ECC-JHF Ⅱ组,采用染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)技术观察金水缓纤组分方Ⅱ对Snai1基因启动子上H3K9me3水平的影响.结果:与空白组相比,122.5 g·L-1 ECC-JHF Ⅱ组细胞活力显著降低(P＜0.01),3.83-61.25 g·L-1 ECC-JHF Ⅱ组细胞活力无显著变化,后续实验ECC-JHF Ⅱ的使用浓度为61.25 g·L-1.与 TGF-β1 组相比,ECC-JHF Ⅱ 组 E-cadherin、SETDB1、H3 K9me3 蛋白表达水平显著上调(P＜0.01),N-cadherin、FN1、Vimentin、Snai1和α-SMA蛋白表达水平显著下调(P＜0.01).ChIP实验结果显示,与空白组相比,TGF-β1组Snai1启动子上H3K9me3减少(P＜0.05);与TGF-β1 组相比,ECC-JHF Ⅱ组Snai1启动子上H3K9me3增加(P＜0.01).敲低 SETDB1 后,A549 细胞 SETDB1、H3K9me3、E-cadherin 蛋白表达显著下调(P＜0.01),Snai1、FN1、N-cadherin蛋白表达显著上调(P＜0.05);ECC-JHF Ⅱ干预后A549细胞中SETDB1、H3K9me3、E-cadherin蛋白表达显著下调(P＜0.01),Snai1、FN1、N-cadherin蛋白表达显著上调(P＜0.01).结论:ECC-JHF Ⅱ可通过上调SETDB1/H3K9me3表观抑制Snai1表达,缓解TGF-β1诱导的A549细胞EMT.
文献关键词：
金水缓纤组分方Ⅱ;SETDB1;Snai1;EMT
中图分类号：
作者姓名：
许朋俐;刘田田
作者机构：
河南中医药大学,河南郑州450046;呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心,河南郑州450046;河南省中医药防治呼吸病重点实验室,河南郑州450046
文献出处：
引用格式：
[1]许朋俐;刘田田-.金水缓纤组分方Ⅱ通过调控SETDB1/Snai1表观抑制A549细胞上皮间质转化)[J].中医学报,2022(06):1269-1277
A类：
Jinshui,Huanxian,JHF,K9me3
B类：
金水,SETDB1,Snai1,A549,细胞上皮间质转化,赖氨酸,甲基转移酶,结构域,domain,bifurcated,表观调控,锌指,snail,family,zinc,finger,effective,component,compatibility,formula,ECC,转化生长因子,transforming,growth,TGF,epithelial,mesenchymal,transition,EMT,体外培养,过细,细胞活性,活性检测,检测试剂盒,cell,counting,Kit,CCK8,细胞活力,Blot,钙粘蛋白,cadherin,纤维连接蛋白,fibronectin,FN1,波形蛋白,Vimentin,平滑肌肌动蛋白,smooth,muscle,actin,SMA,最佳作用浓度,吡非尼酮,pirfenidone,PFD,药物干预,组蛋白,甲基化,histone,lysine,trimethylation,H3K9me3,蛋白表达水平,siRNA,转染,敲低,染色质免疫共沉淀,chromatin,immunoprecipitation,ChIP,技术观,基因启动子
AB值：
0.276367
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