目的 探讨温阳振衰颗粒对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞转分化状态下细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)/信号转导及转录激活因子3(signal transduction and activa-tor of transcription 3,STAT3)信号转导通路的影响.方法 体外培养人肾小管上皮(HK-2)细胞,将HK-2细胞分为空白对照组、TGF-β1组(10 ng/mL TGF-β1)、TGF-β1+空白血清组(10 ng/mL TGF-β1)、TGF-β1+温阳振衰颗粒组(10 ng/mL TGF-β1+10％含药血清)、TGF-β1+U0126组(MEK1/2抑制剂,母液1:10000)、TGF-β1+厄贝沙坦组(10 ng/mL TGF-β1+10％含药血清),处理时间为24 h.倒置显微镜下观察细胞的形态改变,采用Western blot法和RT-qPCR法检测钙黏附蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白和mRNA的表达.结果 与空白对照组比较,TGF-β1组和TGF-β1+空白血清组细胞形态发生明显改变,呈长梭形或形态多样无规则,细胞排列稀疏,类似成纤维细胞形态,生长缓慢,贴壁差,多见漂浮细胞;与TGF-β1组和TGF-β1+空白血清组比较,TGF-β1+温阳振衰颗粒组、TGF-β1+U0126组、TGF-β1+厄贝沙坦组形态显著改善,大部分仍保持鹅卵石样,贴壁尚可,漂浮细胞明显减少.与空白对照组比较,TGF-β1组和TGF-β1+空白血清组E-cadherin蛋白和mRNA表达下调,Vimentin、α-SMA蛋白和mRNA表达上调,p-ERK1/2、p-STAT3蛋白表达上调(P<0.05);与TGF-β1组和TGF-β1+空白血清组比较,TGF-β1+温阳振衰颗粒组、TGF-β1+U0126组和TGF-β1+厄贝沙坦组E-cadherin蛋白和mRNA表达上调,Vimentin、α-SMA蛋白和mRNA表达下调,p-ERK1/2、p-STAT3蛋白表达下调(P<0.05),且3组效果相当;实验所有组别中ERK1/2、STAT3蛋白和mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 温阳振衰颗粒可能通过下调ERK1/2和STAT3蛋白的磷酸化,从而部分阻断ERK/STAT3信号转导通路的激活,对肾小管上皮细胞转分化起到延缓作用.

温阳振衰颗粒;转化生长因子-β1;肾小管;上皮细胞转分化;ERK/STAT3;机制研究

林湘东;向茗;陈新宇

湖南中医药大学第一附属医院,湖南 长沙 410007;湖南中医药大学中医诊断学教研室,湖南 长沙 410208

湖南中医药大学学报

[1]林湘东;向茗;陈新宇-.温阳振衰颗粒对TGF-β1诱导肾小管上皮细胞转分化状态下ERK/STAT3信号转导通路的影响)[J].湖南中医药大学学报,2022(09):1419-1425

1+U0126

温阳振衰颗粒,TGF,肾小管上皮细胞转分化,STAT3,信号转导通路,转化生长因子,transforming,growth,细胞外信号调节激酶,extracellular,signal,regulated,kinase,信号转导及转录激活因子,transduction,activa,transcription,体外培养,HK,空白对照,白血,粒组,1+10,含药血清,MEK1,母液,厄贝沙坦,处理时间,倒置,显微镜下,形态改变,blot,qPCR,黏附蛋白,cadherin,波形蛋白,Vimentin,平滑肌肌动蛋白,SMA,ERK1,磷酸化,细胞形态,形态发生,无规则,成纤维细胞,贴壁,漂浮,鹅卵石,尚可,实验所,组别,表达差异

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