典型文献
去泛素化酶UCHL3维持FLT3-ITD阳性急性髓性白血病细胞存活的功能研究
文献摘要：
目的·探究FMS样的酪氨酸激酶3(FMS-like tyrosine kinase 3,FLT3)近膜区的内部串联重复(FLT3-ITD)阳性急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞中存在表达差异的去泛素化酶及其对FLT3-ITD阳性AML细胞功能的影响.方法·采用Western blotting检测外源性导人FLT3-ITD质粒和使用FLT3-ITD抑制剂对部分去泛素化酶蛋白表达量的影响;利用癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)公共数据库分析泛素羧基末端水解酶L3(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L3,UCHL3)在FLT3-ITD阳性患者中的表达情况及与AML患者预后的相关性;利用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)技术在FLT3-ITD阳性AML细胞系中敲低所筛选出的去泛素化酶;采用细胞计数、CCK-8法、流式细胞术、瑞氏染色检测所筛选出的去泛素化酶对AML细胞功能的影响以及敲低相应的去泛素化酶或使用其抑制剂与全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)的合加效应.结果·Ba/F3细胞中表达FLT3-ITD后能够显著诱导UCHL3的表达,而在FLT3-ITD阳性的MOLM-13和MV4-11细胞系中抑制FLT3-ITD的活性后能够显著抑制UCHL3的表达,该抑制作用具有时间和浓度依赖性.利用数据库分析发现FLT3的表达与UCHL3的表达量在AML中具有显著正相关性(P=0.000),并且UCHL3表达量与AML患者生存率存在显著负相关性(P=0.016).敲低UCHL3对FLT3-ITD阳性AML细胞有抑制增殖和促进凋亡的作用,且敲低UCHL3后细胞核型发生显著改变,分化相关转录因子PU.1和C/EBP0表达显著升高.UCHL3敲低显著增强了 100 nmol/LATRA诱导的MOLM-13和MV4-11细胞凋亡,并且相应的凋亡相关蛋白PARP1、caspase 9和caspase 3均发生明显剪切.同时,敲低UCHL3的细胞在ATRA处理后出现更多核体积变小、核凹陷、呈杆状或不规则状的细胞特征.ATRA与UCHL3抑制剂TCID合加的量效反应曲线表明,TCID与ATRA协同能够抑制MOLM-13和MV4-11细胞活率.结论·FLT3-ITD上调UCHL3促进AML细胞的存活,UCHL3与AML患者预后负相关;敲低或抑制UCHL3协同ATRA能够抑制FLT3-ITD阳性AML细胞的存活.
文献关键词：
泛素羧基末端水解酶L3;急性髓系白血病;FMS样的酪氨酸激酶3;FMS样的酪氨酸激酶3近膜区的内部串联重复;全反式维甲酸
中图分类号：
作者姓名：
胡家诚;朱倩;王佳琦;吴英理;雷虎
作者机构：
上海交通大学基础医学院病理生理学系,上海200025
文献出处：
引用格式：
[1]胡家诚;朱倩;王佳琦;吴英理;雷虎-.去泛素化酶UCHL3维持FLT3-ITD阳性急性髓性白血病细胞存活的功能研究)[J].上海交通大学学报（医学版）,2022(10):1383-1393
A类：
UCHL3,MOLM,EBP0,LATRA,多核体,TCID
B类：
去泛素化酶,FLT3,ITD,性急,急性髓性白血病,细胞存活,功能研究,FMS,酪氨酸激酶,like,tyrosine,kinase,急性髓系白血病,acute,myeloid,leukemia,AML,表达差异,细胞功能,blotting,外源性,质粒,分去,癌症基因组图谱,cancer,genome,atlas,TCGA,公共数据库,数据库分析,羧基,端水,水解酶,ubiquitin,carboxyl,terminal,hydrolase,短发,发夹,short,hairpin,shRNA,细胞系,敲低,CCK,流式细胞术,全反式维甲酸,all,trans,retinoic,acid,Ba,F3,MV4,浓度依赖性,细胞核,核型,PU,nmol,凋亡相关蛋白,PARP1,caspase,凹陷,杆状,细胞活率
AB值：
0.222251
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