典型文献
增强型绿色荧光蛋白标记膀胱癌外泌体的构建及其体外示踪作用
文献摘要:
目的 构建稳定表达CD63-增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合蛋白的膀胱癌细胞株,得到EGFP标记的膀胱癌外泌体,进行外泌体的体外示踪.方法 将CD63基因通过分子克隆插入pLVX-EGFP-puro质粒中,构建CD63-EGFP融合蛋白的表达载体.通过慢病毒转染得到稳定表达CD63-EGFP融合蛋白的膀胱癌细胞株,超速离心法提取外泌体,使用透射电子显微镜、粒径分析和Western blot鉴定外泌体.通过共培养的方式检测人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1和人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)对膀胱癌外泌体的摄取情况.结果 构建了稳定表达CD63-EGFP融合蛋白的膀胱癌细胞株,其分泌的外泌体符合外泌体经典特征,并发现SV-HUC-1细胞和PBMC中的单核细胞可在体外摄取膀胱癌外泌体.结论 表达CD63-EGFP融合蛋白的膀胱癌细胞能分泌出荧光外泌体,可用于外泌体的体外示踪.
文献关键词:
膀胱癌;外泌体;增强型绿色荧光蛋白;示踪
中图分类号:
作者姓名:
陈辉;侯爱华;王培培;梅晓峰
作者机构:
450000 河南省郑州市 河南中医药大学第一附属医院
文献出处:
引用格式:
[1]陈辉;侯爱华;王培培;梅晓峰-.增强型绿色荧光蛋白标记膀胱癌外泌体的构建及其体外示踪作用)[J].组织工程与重建外科杂志,2022(04):300-305
A类:
B类:
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AB值:
0.292183
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