目的 寻找在肝细胞肝癌(HCC)中差异表达的环状RNA(circRNA)并探讨其对HCC的诊断价值.方法 选取行根治性切除术的HCC患者256例(HCC组),其中发现集25例、训练集126例、验证集105例;乙型肝炎相关肝硬化患者100例(肝硬化组),其中训练集50例、验证集50例;健康体检者125名(正常对照组),其中发现集25名、训练集50名、验证集50名.采用沉淀法分离血浆外泌体,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测外泌体circRNA的表达.采用Logistic回归分析构建HCC诊断模型,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析模型的诊断效能.结果 与正常肝细胞系L02比较,肝癌细胞系Hep3B有102个exo-circRNA表达升高(P<0.05).与exoRBase数据库比对后,鉴定出4个HCC患者表达量升高的外泌体circRNA(circ_0000690、circ_0001359、circ_0000396和circ_0000722).肝癌组circ_0000690、circ_0001359和circ_0000396表达量显著高于正常对照组(P<0.05),circ_0000722表达量2个组之间差异无统计学意义(P>0.05).无论是训练集还是验证集,肝癌组circ_0000690表达量均高于肝硬化组和正常对照组(P<0.001);正常对照组、肝硬化组及肝癌组circ_0001359表达量依次升高(P<0.05);肝癌组与肝硬化组之间circ_0000396表达量差异无统计学意义(P>0.05),但均高于正常对照组(P<0.05).建立的联合检测模型为:Logit(P)=1.110×circ_0000690+0.822×circ_0001359+0.622×circ_0000396-4.153.ROC曲线分析结果显示,在训练集中,circ_0000690、circ_0001359、circ_0000396及联合检测模型诊断HCC的曲线下面积(AUC)分别为0.802、0.726、0.621、0.859,诊断早期HCC(巴塞罗那分期0+A期)的AUC分别为0.767、0.698、0.611、0.847,诊断甲胎蛋白(AFP)阴性(<20 ng/mL)HCC的AUC分别为0.810、0.695、0.588、0.894;在验证集中,诊断HCC的AUC分别为0.752、0.663、0.615、0.847,诊断早期HCC的AUC分别为0.763、0.673、0.591、0.845,诊断AFP阴性HCC的AUC分别为0.702、0.670、0.641、0.840.结论 基于3种circRNA(circ_0000690、circ_0001359和circ_0000396)构建的联合检测模型对HCC具有较优异的诊断效能,亦适用于早期HCC和AFP阴性HCC的鉴别诊断.

环状RNA;circ_0000690;circ_0001359;circ_0000396;circ_0000722;外泌体;甲胎蛋白;肝细胞肝癌

孟俊;王俊青;费晓春;顾志冬

上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科,上海 200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科,上海 200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院病理科,上海 200025

检验医学

[1]孟俊;王俊青;费晓春;顾志冬-.血浆外泌体circRNA诊断HCC联合检测模型的建立与验证)[J].检验医学,2022(01):1-10

0000690+0,0001359+0,0+A

血浆外泌体,circRNA,HCC,联合检测,检测模型,建立与验证,肝细胞肝癌,差异表达,诊断价值,根治性切除术,训练集,验证集,乙型肝炎,肝炎相关,肝硬化患者,健康体检者,正常对照,沉淀法,实时定量聚合酶链反应,qPCR,诊断模型,受试者工作特征,诊断效能,肝细胞系,L02,肝癌细胞,Hep3B,exoRBase,库比,Logit,巴塞罗那分期,甲胎蛋白,AFP,鉴别诊断

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