目的 采用网络药理学和体外实验探讨小柴胡汤扶正祛邪的核心配伍"柴胡-黄芩-人参"治疗流行性感冒的作用靶点及信号通路.方法 筛选"柴胡-黄芩-人参"有效成分并对应靶点基因,并检索流感疾病靶点.应用Cytoscape3.6.1软件构建"柴胡-黄芩-人参"-流感-靶点-通路网络,筛选核心靶点基因,进行GO功能和KEGG富集分析.根据网络药理学结果,基于自噬途径以甲型H1N1流感病毒感染的狗肾(MDCK)细胞为研究对象,以柴胡-黄芩-人参和自噬抑制剂3-MA为干预药物,孵育12 h后,用Westernblot法检测自噬标志蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及自噬降解底物P62的表达量.结果 预测获得"柴胡-黄芩-人参"治疗流感的靶点102个,其主要活性成分有豆甾醇、β-谷甾醇、二甲氧基黄酮、千层纸甲素A、黄芩新素、荠苎黄酮、汉黄芩素等,其核心基因为AKT1、IL6、VEGFA、TNF、TP53、JUN、CXCL8等54个,涉及生物过程及相关代谢通路多与炎症反应、各种代谢、免疫反应、细胞死亡等相关.根据以上网药预测结果及相关文献,筛选自噬途径进行细胞生物学层面的实验验证,结果显示,甲型H1N1病毒感染组与空白对照组相比,LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P＜0.01)."柴胡-黄芩-人参"颗粒剂与病毒感染组相比,有下调LC3-Ⅱ蛋白表达的作用(P＜0.01),并上调 自噬降解底物P62蛋白的表达(P＜0.05).结论 小柴胡汤扶正祛邪的核心配伍"柴胡-黄芩-人参"对流感病毒抑制(如干预病毒吸附)和宿主因素调节(如免疫应答、活性氧调节、细胞死亡、各种代谢等)两方面都发挥着抗流感的作用,尤以调节宿主内环境的稳态(如自噬)为主,并通过体外实验初步验证,"柴胡-黄芩-人参"可能是通过调节AKT抑制甲型H1N1流感病毒诱导的细胞自噬,从而调控甲型H1N1流感病毒的致病作用,这也正与其体现的"扶正祛邪"治法高度吻合.

柴胡-黄芩-人参;小柴胡汤;流行性感冒;网络药理学;自噬

王上;杨特达;李家庚;王彦春;蔡羽;王建婷;陈雨

湖北中医药大学中医临床学院 武汉 430065;湖北中医药大学药学院 武汉 430065

世界科学技术-中医药现代化

[1]王上;杨特达;李家庚;王彦春;蔡羽;王建婷;陈雨-.基于网络药理学及体外实验探讨柴胡-黄芩-人参治疗流行性感冒的作用机制研究)[J].世界科学技术-中医药现代化,2022(09):3419-3431

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