目的 肝纤维化是慢性肝病发展的共同病理特征,但目前国内外尚缺乏理想的抗肝纤维化药物.文章旨探索汉黄芩苷在肝纤维化和肝星状细胞活化中的作用机制.方法 用四氯化碳(CCl4)诱导C57BL/6雄性小鼠肝纤维化模型,将小鼠按随机数字表法分为正常组、模型组和汉黄芩苷组(10、20和40 mg/kg).除正常组外,其余4组均腹腔注射CCl4建立肝纤维化模型,第4周开始给予汉黄芩苷灌胃.各组小鼠于造模第8周末处死.HE染色观察肝组织病理形态;生化法检测小鼠血清中血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和肝丙二醛(MDA)含量;免疫组化和Western blot检测肝组织中α-SMA、COL1α1和fibronectin表达情况.体外实验分组为正常组、PDGF-BB组、汉黄芩苷组(40、60和80μmol/L).采用PDGF-BB诱导HSC-T6细胞活化,并加入不同浓度汉黄芩苷,MTT检测HSC-T6细胞活力;免疫荧光和qRT-PCR检测α-SMA和COL1α1蛋白表达;Western blot检测SOCS1和细胞周期相关蛋白.结果 HE染色显示,模型组小鼠肝小叶排列紊乱,大量炎性细胞浸润,空泡增多;而汉黄芩苷高剂量组(40 mg/kg)中肝小叶排列较规则,炎性细胞以及空泡明显减少.免疫组化和Western blot结果结果均显示,模型组α-SMA、COL1α1和fibronectin在肝纤维化瘢痕周围大量表达,在汉黄芩苷组(40 mg/kg)中表达显著降低(P<0.05).与正常组相比,模型组小鼠肝组织中SOCS1基因和蛋白水平表达明显降低(P<0.05).与模型组相比,汉黄芩苷给药组可显著升高SOCS1基因以及蛋白水平表达(P<0.05).qRT-PCR以及Western blot结果显示siRNA 2和siRNA 3均能明显下调SOCS1的基因和蛋白表达(P<0.05),其中siRNA 2的靶向效率达到0.286.与PDGF-BBα-SMA(1.0±0.1)、COL1α1(1.0±0.1)和fibronectin基因组(1.1±0.3)相比,汉黄芩苷组(1.1±0.1、1.3±0.1、1.1±0.3)有明显抑制作用(P<0.05).而加入SOCS1 siRNA 2后,α-SMA、COL1α1和fibronectin基因水平(2.0±0.1、2.0±0.2、2.1±0.2)升高(P<0.05).结论 汉黄芩苷通过调控SOCS1水平,抑制HSC-T6细胞增殖,从而有效缓解肝损伤和肝纤维化.

汉黄芩苷;肝纤维化;肝星状细胞;细胞因子信号转导抑制因子1

刘国芳;袁思雨;李嘉豪;张丽君;王国凯;方玲

230012 合肥,安徽中医药大学药学院;230022 合肥,安徽医科大学第一附属医院药剂科;230032 合肥,安徽医科大学药学院

医学研究与战创伤救治

[1]刘国芳;袁思雨;李嘉豪;张丽君;王国凯;方玲-.汉黄芩苷调控细胞因子信号转导抑制因子1对肝纤维化的作用)[J].医学研究与战创伤救治,2022(03):236-244

汉黄芩苷,细胞因子信号转导抑制因子,慢性肝病,病理特征,尚缺,抗肝纤维化,化药,肝星状细胞,细胞活化,四氯化碳,CCl4,C57BL,雄性小鼠,肝纤维化模型,腹腔注射,灌胃,周末,处死,HE,肝组织病理,病理形态,生化法,小鼠血清,丙氨酸转氨酶,ALT,天冬氨酸转氨酶,AST,免疫组化,blot,SMA,COL1,fibronectin,体外实验,PDGF,BB,HSC,T6,MTT,细胞活力,免疫荧光,qRT,SOCS1,细胞周期,小叶,炎性细胞浸润,空泡,高剂量,瘢痕,蛋白水平表达,药组,siRNA,基因水平,肝损伤

0.226306