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基于CRISPR/Cas9系统构建Slfn2基因敲除的小鼠肺癌细胞系
文献摘要：
为构建Slfn2-/-小鼠肺癌细胞系(Lewis lung carcinoma,LLC),本文利用CRISPR/Cas9技术,在CHOPCHOP网站筛选Slfn2基因的sgRNA序列,将合成的oligo序列退火后连接至pLenti CRISPR v2质粒中,并与pMD2.G、psPAX2共转染至293T细胞中包装慢病毒;利用包装的慢病毒感染LLC细胞,经筛选和单克隆培养,获取Slfn2--敲除的LLC细胞.结果显示:SgRNA成功插入载体重组质粒;利用3质粒包装的慢病毒成功将LLC中的Slfn2基因突变,获得丢失8个碱基移码突变和丢失180个碱基缺失突变的Slfn2-/-小鼠肺癌细胞.可见,利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Slfn2基因敲除的小鼠肺癌细胞.
文献关键词：
肺癌;慢病毒;Slfn2;CRISPR/Cas9
中图分类号：
作者姓名：
陈莹;周祖平;邢兵;蒲仕明
作者机构：
广西师范大学 生命科学学院,广西 桂林541006;广西高校干细胞与医药生物技术重点实验室(广西师范大学),广西 桂林541004;广西师范大学 生物医学研究中心, 广西 桂林541004
文献出处：
引用格式：
[1]陈莹;周祖平;邢兵;蒲仕明-.基于CRISPR/Cas9系统构建Slfn2基因敲除的小鼠肺癌细胞系)[J].广西师范大学学报（自然科学版）,2022(04):173-179
A类：
Slfn2,SgRNA
B类：
CRISPR,Cas9,系统构建,基因敲除,肺癌细胞,细胞系,Lewis,lung,carcinoma,LLC,CHOPCHOP,sgRNA,oligo,退火,pLenti,v2,pMD2,psPAX2,共转染,293T,慢病毒感染,单克隆,重组质粒,基因突变,移码突变,碱基缺失,缺失突变
AB值：
0.307965
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