[目的]本研究旨在探讨抑制miR-4321在改善脓毒症相关急性肾损伤(Sepsis associated acute kidney injury,SA-AKI)中的作用和机制.[方法]采用RT-qPCR方法检测LPS诱导的HK2细胞模型和CLP模型小鼠肾脏组织中miR-3165、miR-4270和miR-4321的表达水平.利用miR-4321-Inhibitor抑制LPS诱导的HK2细胞损伤模型中miR-4321的表达,分别通过CCK-8分析、EdU染色分析和western blotting评估miR-4321对细胞增殖、细胞活力、细胞因子和凋亡相关蛋白水平的影响.利用miR-4321-Antago干预CLP模型小鼠肾组织中miR-4321的表达,通过H&E染色检测肾组织结构变化,比色法检测血清中肌酐和血尿氮水平,ELISA检测血清中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,IHC染色检测组织中mTOR水平,western blot-ting检测肾组织中凋亡相关蛋白表达水平.机制上,使用Targetscan软件预测miR-4321的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验对靶基因进行验证.[结果]与对照组相比,LPS诱导的HK2细胞中miR-4321(n=3,t=7.154,P=0.0013)表达升高;miR-4321-Inhibitor可促进HK2细胞增殖和细胞活力,并降低LPS诱导的IL-1β,IL-6和TNF-α水平的表达.体内实验证明miR-4321-Antago能够抑制CLP小鼠血清中肌酐和血尿氮水平,改善肾组织损伤,降低血清中IL-1β,IL-6和TNF-α水平,促进肾组织mTOR表达,抑制凋亡相关蛋白的表达.此外,mTOR是miR-4321的靶基因之一.[结论]抑制miR-4321可明显减轻脓毒症相关急性肾损伤,这一作用可能是通过增加mTOR的表达实现的.

脓毒症相关急性肾损伤;脂多糖;miR-4321;mTOR

张春敏;陈飞燕;杨文敏;林永敏;毛碧涛;陈洁;武志远;梁宇峰

广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心儿童重症监护室,广东广州510120

中山大学学报（医学科学版）

[1]张春敏;陈飞燕;杨文敏;林永敏;毛碧涛;陈洁;武志远;梁宇峰-.抑制miR-4321减轻脓毒症相关急性肾脏损伤的作用和机制研究)[J].中山大学学报（医学科学版）,2022(06):928-937

Antago

miR,急性肾脏损伤,脓毒症相关急性肾损伤,Sepsis,associated,acute,kidney,injury,AKI,qPCR,LPS,HK2,细胞模型,CLP,模型小鼠,Inhibitor,细胞损伤,损伤模型,CCK,EdU,染色分析,western,blotting,细胞活力,凋亡相关蛋白,比色法,肌酐,血尿,尿氮,氮水平,IHC,mTOR,蛋白表达水平,Targetscan,软件预测,靶基因,双荧光素酶报告基因实验,对靶,体内实验,小鼠血清,肾组织损伤,低血清,抑制凋亡,脂多糖

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