典型文献
奶山羊p27基因克隆分析及其对乳腺上皮细胞增殖的影响
文献摘要：
细胞周期依赖性激酶抑制蛋白B(cyclin dependent kinase inhibitors B,CDKNIB,即p27)可以抑制细胞周期蛋白-细胞周期蛋白依赖性激酶复合物,阻滞细胞周期进程.通过克隆获得奶山羊p27基因序列并阐明其编码蛋白的生物学特性,利用RN Ai干扰技术和基因过表达技术沉默和上调奶山羊乳腺上皮细胞中p27基因的表达,以探究p27基因对乳腺上皮细胞增殖的影响.以西农萨能奶山羊乳腺组织为实验材料,扩增并克隆出奶山羊p27基因CDS全长序列,其全长597 bp,编码198个氨基酸.对p27基因编码蛋白进行生物信息学分析,发现其为亲水性不稳定蛋白,无跨膜结构.利用实时荧光定量PCR检测奶山羊p27基因mRNA在不同时期乳腺组织中的表达情况,发现p27基因在泌乳期的表达量高于干奶期.将构建的p27基因真核表达质粒转染奶山羊乳腺上皮细胞,使用CCK-8、Edu染色及蛋白质印迹法(Western blot)检测p27基因对乳腺上皮细胞增殖的影响,发现过表达p27基因抑制了乳腺上皮细胞的增殖和DN A合成,并使得CDK2蛋白表达水平升高(P<0.05).上述结果提示p27可作为负调节因子参与乳腺上皮细胞增殖,研究结果为p27调控乳腺发育的分子机理提供了基础资料.
文献关键词：
奶山羊;p27基因;克隆;细胞增殖
中图分类号：
作者姓名：
岳子婷;黄江涛;宁勇;宗学阳;张华文;史怀平
作者机构：
西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌 712100
文献出处：
引用格式：
[1]岳子婷;黄江涛;宁勇;宗学阳;张华文;史怀平-.奶山羊p27基因克隆分析及其对乳腺上皮细胞增殖的影响)[J].陕西师范大学学报（自然科学版）,2022(05):81-89
A类：
CDKNIB
B类：
p27,基因克隆,乳腺上皮细胞,酶抑制,cyclin,dependent,kinase,inhibitors,细胞周期蛋白依赖性激酶,复合物,基因序列,编码蛋白,生物学特性,Ai,干扰技术,基因过表达,山羊乳,西农萨能奶山羊,乳腺组织,实验材料,出奶,CDS,全长,bp,基因编码,生物信息学分析,亲水性,膜结构,泌乳期,干奶期,真核表达质粒,质粒转染,CCK,Edu,蛋白质印迹法,blot,基因抑制,细胞的增殖,DN,CDK2,蛋白表达水平,调节因子,乳腺发育,分子机理,基础资料
AB值：
0.253443
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