典型文献
转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因鉴定及表达检测
文献摘要：
背景:转基因植物可食性疫苗是以植物作为载体,将外源性基因整合到植物基因组当中,进一步激活动物或人体免疫系统以获得特异性免疫能力.但外源性基因的持续低表达量一直无法达到满意的免疫效果.目的:用分子生物学技术检测转基因番茄植株中pacA-ctxB融合基因表达及目的蛋白的表达量,为进一步观察可食用防龋疫苗的防龋效果提供研究基础.方法:①提取转基因番茄叶片总DNA,PCR检测外源性融合基因pacA-ctxB,实验分组3组:阳性对照组为质粒p2355-EPC10;空白对照组为普通番茄1株(红抗219);转基因组为转基因番茄9株;②BCA法检测转基因番茄果肉中总蛋白的水平;Western blot证实转基因番茄果实中PAcA/CTB目的蛋白的表达,目的蛋白检测分组2组:转基因组为表达外源性嵌合基因的转基因番茄5株(PCR检测阳性);空白对照组为普通番茄1株;酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测转基因番茄果实中PAcA/CTB目的蛋白浓度.结果 与结论:①PCR扩增结果可见9株转基因番茄中有5株出现约1.7 kb特异性扩增条带,占总检测植株的55％;②转基因番茄总蛋白为3.15 g/L;Western blot可见PCR检测为阳性的转基因番茄蛋白提取样本在分子质量约为58 kD处均出现了高密度条带,非转基因番茄蛋白样本未见特异条带;ELISA测得目的蛋白表达量约4.12 mg/L,占番茄可溶性总蛋白的0.13％;③结果说明,外源性融合基因pacA-ctxB能够在番茄植株中表达及产生目的蛋白.
文献关键词：
防龋疫苗;转基因番茄;龋齿
中图分类号：
作者姓名：
关薇薇;顾瑜;管晓燕;吴家媛;白国辉;田源;刘建国
作者机构：
中南大学湘雅医学院附属海口医院·海南省口腔医学中心,海南省海口市570208;遵义医科大学附属口腔医院,贵州省遵义市563099;贵州省高等学校口腔疾病研究特色重点实验室·遵义市口腔疾病研究重点实验室,贵州省遵义市563006
文献出处：
引用格式：
[1]关薇薇;顾瑜;管晓燕;吴家媛;白国辉;田源;刘建国-.转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因鉴定及表达检测)[J].中国组织工程研究,2022(02):171-175
A类：
防龋疫苗,pacA,ctxB,p2355,EPC10,PAcA
B类：
转基因番茄,目的基因,基因鉴定,转基因植物,可食性,外源性,基因整合,合到,植物基,人体免疫,免疫系统,特异性免疫,免疫能力,低表达,免疫效果,分子生物学技术,植株,融合基因,目的蛋白,可食用,防龋效果,番茄叶片,阳性对照,质粒,空白对照,BCA,果肉,总蛋白,blot,番茄果实,CTB,蛋白检测,嵌合,酶联免疫吸附实验,蛋白浓度,扩增结果,kb,条带,蛋白提取,分子质量,kD,龋齿
AB值：
0.224047
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
