目的:观察妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘组织中Apelin和其受体血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白(APJ)表达情况,探讨其对滋养层细胞胰岛素抵抗(IR)、增殖和侵袭能力的影响.方法:收集GDM患者(GDM组,30例)和糖耐量正常(NGT)孕产妇(NGT组,30例)胎盘组织.采用免疫组织化学法检测2组研究对象胎盘组织中Apelin和APJ阳性表达率,Western blotting法检测胎盘组织中Apelin和APJ蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测胎盘组织中Apelin、APJ和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)mRNA表达水平,Pearson相关分析法分析Apelin和APJ mRNA表达水平与AMPK mRNA表达水平的相关性.体外培养滋养层细胞HTR-8/SVneo(HTR-8),分为对照组、Apelin组、高糖组(HG组)、HG+Apelin组和HG+Apelin+anti-APJ组;采用Western blotting法检测各组细胞中Apelin、APJ和胰岛素信号传递中胰岛素受体底物1(IRS1)、胰岛素受体底物2(IRS2)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达水平及磷脂酰肌醇3-激酶蛋白磷酸化(p-PI3K/PI3K)和AMPK蛋白磷酸化(p-AMPK/AMPK)水平,5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)试剂盒检测各组细胞EdU阳性表达率,Transwell小室实验检测各组侵袭细胞数.结果:Apelin和APJ在胎盘绒毛组织中广泛表达;与NGT组比较,GDM组患者胎盘组织中Apelin和APJ mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05).相关性分析,GDM组患者胎盘组织中Apelin和APJ mRNA表达水平与AMPK mRNA表达水平呈正相关关系(R2=0.148,P<0.05;R2=0.275,P<0.05).Western blooting法检测,与对照组比较,Apelin组细胞中Apelin、APJ、IRS1、IRS2和GLUT4蛋白表达水平及p-PI3K/PI3K和p-AMPK/AMPK比值明显升高(P<0.05),HG组、HG+Apelin组和HG+Apelin+anti-APJ组细胞中Apelin、APJ、IRS1、IRS2和GLUT4蛋白表达水平及p-PI3K/PI3K和p-AMPK/AMPK比值均明显降低(P<0.05);与HG组比较,HG+Apelin组细胞中IRS1、IRS2和GLUT4蛋白表达水平及p-PI3K/PI3K和p-AMPK/AMPK比值明显升高(P<0.05),HG+Apelin+anti-APJ组细胞中上述指标差异均无统计学意义(P>0.05).EdU和Transwell小室实验,与对照组比较,Apelin组细胞EdU阳性表达率和侵袭细胞数明显升高(P<0.05),HG组、HG+Apelin组和HG+Apelin+anti-APJ组细胞EdU阳性表达率和侵袭细胞数均明显降低(P<0.05);与HG组比较,HG+Apelin组细胞EdU阳性表达率和侵袭细胞数均明显升高(P<0.05),HG+Apelin+anti-APJ组上述指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论:Apelin和APJ在GDM患者胎盘组织中表达降低,外源性给予Apelin后可改善滋养层细胞IR,并促进HG环境下的滋养层细胞增殖和侵袭能力,其机制可能与Apelin上调AMPK信号通路蛋白表达有关.

妊娠期糖尿病;Apelin;血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白;胰岛素抵抗;滋养层细胞

刘莎莎;赵云;孙国强;陈菲菲

湖北省妇幼保健院产科,湖北 武汉 430070;湖北省妇幼保健院妇产科,湖北 武汉 430070

吉林大学学报（医学版）

[1]刘莎莎;赵云;孙国强;陈菲菲-.妊娠期糖尿病患者胎盘组织中Apelin和APJ的表达及其对滋养层细胞胰岛素抵抗和行为的影响)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(05):1314-1323

HG+Apelin,HG+Apelin+anti,blooting

妊娠期糖尿病患者,胎盘组织,APJ,滋养层细胞,胰岛素抵抗,GDM,血管紧张素,侵袭能力,糖耐量正常,NGT,孕产妇,免疫组织化学法,阳性表达率,blotting,检测胎,蛋白表达水平,qPCR,腺苷酸活化蛋白激酶,AMPK,相关分析法,体外培养,HTR,SVneo,高糖,胰岛素信号,信号传递,胰岛素受体,底物,IRS1,IRS2,葡萄糖转运蛋白,GLUT4,磷脂酰肌醇,蛋白磷酸化,PI3K,脱氧,尿嘧啶,EdU,试剂盒,Transwell,小室,实验检测,胎盘绒毛组织,组织中表达,外源性,细胞增殖和侵袭,通路蛋白

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