目的 探讨高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞(hRECs)迁移能力、成管能力、愈合能力的影响及其机制.方法 取对数生长期的hRECs,将细胞分为低糖(LG)组、高糖(HG)组、miR-615-5p模拟物(mimic)组、miR-615-5p模拟物阴性对照(mi-nc)组、miR-615-5p抑制剂(inhibitor)组、miR-615-5p抑制剂阴性对照(in-nc)组.LG组hRECs用含5.5 mmol·L-1葡萄糖的培养基培养,其余各组hRECs均用含25.0 mmol·L-1葡萄糖的培养基培养.qRT-PCR分析LG组与HG组hRECs中miR-615-5p的相对表达情况;Tran-swell实验、成管实验、划痕愈合实验分析各组hRECs的细胞迁移能力、成管能力和愈合能力;免疫荧光实验分析miR-615-5p对hRECs中血管内皮生长因子A(VEGFA)表达量的影响.结果 与LG组(1.00±0.28)相比,HG组hRECs中miR-615-5p的相对表达水平(6.36±1.31)上升(t=12.69,P<0.01).Transwell实验中,HG组、mimic组、mi-nc组、in-hibitor组和in-nc组的hRECs相对细胞迁移数分别为0.99±0.12、0.96±0.08、0.50±0.07、0.72±0.13和0.96±0.10,与mi-nc组相比,mimic组中hRECs的迁移能力显著增强(t=6.10,P<0.05);与in-nc组相比,inhibitor组中hRECs的迁移能力显著降低(t=7.21,P<0.05).成管实验结果显示,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组hRECs的相对成管管长分别为1.00±0.15、1.24±0.13、0.81±0.13、0.40±0.05和0.86±0.04;与mi-nc组相比,mimic组hRECs的成管能力显著增强(t=5.52,P<0.01);相较于in-nc组,inhibitor组hRECs的成管能力显著降低(t=17.80,P<0.01).划痕愈合实验显示,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组hRECs的创面愈合率分别为0.71±0.01、1.00±0.01、0.64±0.02、0.56±0.05和0.54±0.04,相较于mi-nc组,mimic组中hRECs的愈合能力显著增强(t=25.30,P<0.01).免疫荧光实验显示,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组的VEGFA相对荧光强度分别为1.00±0.09、1.35±0.10、1.02±0.04、0.77±0.06和0.84±0.06,相较于mi-nc组,mimic组hRECs中VEGFA的表达水平增加(t=3.78,P<0.05).结论 高糖环境促进了hRECs中miR-615-5p的表达,进而促进了hRECs的成管能力、迁移能力和愈合能力,同时miR-615-5p的下游靶点可能是VEGFA.

人视网膜内皮细胞;miR-615-5p;血管内皮生长因子A

邵珺;胡迪;田一焜

214023 江苏省无锡市,南京医科大学附属无锡人民医院眼科;214122 江苏省无锡市,江南大学生物工程学院

眼科新进展

[1]邵珺;胡迪;田一焜-.高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞的影响研究)[J].眼科新进展,2022(03):184-188

人视网膜内皮细胞,hRECs

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