目的 探讨下调RACK1表达对子宫颈癌ME180细胞的脂质合成及迁移、侵袭和增殖的影响.方法 qRT-PCR法检测子宫颈癌组织和细胞以及正常子宫颈组织和细胞中RACK1的mRNA表达水平,随后利用Western blot法检测RACK1蛋白表达;BODIPY染色观察H8、ME180和SiHa细胞中脂滴含量.采用慢病毒转染技术构建RACK1干扰稳转细胞株,利用qRT-PCR法及Western blot法验证敲降效果.qRT-PCR法检测组织和细胞中脂肪酸合成关键基因FASN和ACC1的表达,Western blot法检测FASN和ACC1的蛋白表达;BODIPY染色和电镜观察脂滴含量变化;采用柠檬酸、脂肪酸试剂盒检测子宫颈癌ME180细胞中柠檬酸及脂肪酸含量;将shRACK1-ME180组细胞进行油酸(OA)处理后,Transwell观察OA处理前后细胞的侵袭及转移能力;平板克隆实验检测细胞增殖情况.结果 子宫颈癌组织中RACK1 mRNA表达(2.38±1.78)高于正常子宫颈组织(0.43±0.47)(P<0.001);子宫颈癌细胞ME180与SiHa中RACK1的mRNA(1.67±0.05、1.39±0.08)及蛋白(1.58±0.08、1.32±0.08)表达均高于H8细胞(1.00±0.03、0.41±0.08)(P均<0.05),且ME180细胞中的表达最高;ME180细胞内脂滴含量(1.10±0.15)较SiHa细胞(0.36±0.21)丰富,且2株子宫颈癌细胞内脂质含量均高于H8细胞(0.15±0.01)(P<0.05);子宫颈癌组织中FASN(2.98±1.53)和ACC1(2.41±1.25)mRNA表达量显著高于正常子宫颈组织(0.85±0.37、0.69±0.28)(P<0.05),且RACK1 mRNA表达与FASN和ACC1 mRNA表达呈正相关(r=0.693,P<0.001;r=0.752,P<0.001);shRACK1-ME180组FASN(0.28±0.02 vs 1.00±0.01)和ACC1表达(0.24±0.03 vs 1.00±0.01)及细胞内脂质(0.62±0.09 vs 1.09±0.16)、脂肪酸(0.94±0.07 vs 2.13±0.27)及柠檬酸(3.46±0.77 vs 5.89±0.47)含量均低于shNON-ME180组(P均<0.05);且shRACK1-ME180组细胞侵袭、迁移及增殖能力显著下降(P<0.001).经OA处理后,shRACK1-ME180组细胞侵袭、迁移及增殖能力恢复,且与shNON-ME180组相近.结论 下调RACK1表达干扰子宫颈癌ME180细胞脂质合成,抑制细胞侵袭、迁移及增殖能力,为探究子宫颈癌的发生、发展提供理论依据.

子宫颈肿瘤;脂质合成;RACK1;侵袭;迁移;增殖

徐丽秀;李金秋;哈提拉·吐尔逊;阿仙姑·哈斯木

新疆医科大学基础医学院/新疆地方病分子生物学实验室,乌鲁木齐 836001

临床与实验病理学杂志

[1]徐丽秀;李金秋;哈提拉·吐尔逊;阿仙姑·哈斯木-.RACK1通过调控脂质合成促进子宫颈癌ME180细胞侵袭、迁移及增殖)[J].临床与实验病理学杂志,2022(07):775-782

ME180,shRACK1,shNON

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